Четвертая Директива Комиссии 85/490/EEC от 11 октября 1985 г. о сближении законодательства государств-членов, касающегося методов анализа, необходимых для проверки состава косметической продукции.

7.11.1985

В

Официальный журнал Европейских сообществ

Л 295/30

ЧЕТВЕРТАЯ ДИРЕКТИВА КОМИССИИ

от 11 октября 1985 г.

о сближении законодательства государств-членов в отношении методов анализа, необходимых для проверки состава косметической продукции

(85/490/ЕЕС)

КОМИССИЯ ЕВРОПЕЙСКИХ СООБЩЕСТВ,

Принимая во внимание Договор о создании Европейского экономического сообщества,

Принимая во внимание Директиву Совета 76/768/EEC от 27 июля 1976 г. о сближении законов государств-членов, касающихся косметической продукции (1), с последними поправками, внесенными Директивой 85/391/EEC (2), и, в частности, статьей 8 (1) из них,

Принимая во внимание, что Директива 76/768/EEC предусматривает официальное тестирование косметической продукции с целью обеспечения соблюдения условий, установленных положениями Сообщества относительно состава косметической продукции;

Принимая во внимание, что все необходимые методы анализа должны быть разработаны как можно быстрее; поскольку три шага к достижению этой цели уже были предприняты посредством определения определенных методов в Директиве Комиссии 80/1335/EEC (3), 82/434/EEC (4) и 83/514/EEC (5), четвертый этап должен состоять в определении методов идентификации и определения 1-(4-аминобензоата глицерина), определения хлорбутанола, идентификации и определения хинина, идентификации и определения неорганических сульфитов и гидросульфитов, идентификации и определение хлоратов щелочных металлов и идентификация и определение йодата натрия;

Поскольку меры, предусмотренные настоящей Директивой, соответствуют мнению Комитета по адаптации Директивы 76/768/ЕЕС к техническому прогрессу,

ПРИНЯЛ НАСТОЯЩУЮ ДИРЕКТИВУ:

Статья 1

Государства-члены должны принять все необходимые меры для обеспечения того, чтобы во время официального тестирования косметической продукции:

—

идентификация и определение 1-(4-аминобензоата) глицерина,

—

определение хлорбутанола,

—

идентификация и определение хинина,

—

идентификация и определение неорганических сульфитов и гидросульфитов,

—

идентификация и определение хлоратов щелочных металлов, и

—

идентификацию и определение йодата натрия проводят в соответствии с методиками, описанными в приложении.

Статья 2

Государства-члены должны ввести в действие законы, правила или административные положения, необходимые для соблюдения настоящей Директивы, не позднее 31 декабря 1986 г.

Они должны немедленно проинформировать об этом Комиссию.

Статья 3

Данная Директива адресована государствам-членам.

Совершено в Брюсселе 11 октября 1985 года.

Для Комиссии

Стэнли КЛИНТОН-ДЭВИС

Член Комиссии

(1)  ОЖ № L 262, 27.9.1976, с. 169.

(2) ОЖ № L 224, 22.8.1985, с. 40.

(3) ОЖ № L 383, 31.12.1980, с. 27.

(4)  ОЖ № L 185, 30. 6. 1982, с. 1.

(5)  ОЖ № L 291, 24.10.1983, с. 9.

ПРИЛОЖЕНИЕ

ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЛИЦЕРИНА l-(4-АМИНОБЕНЗОАТА)

А.   ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1.   ОБЪЕМ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод позволяет обнаружить альфа-моноглицерил-4-аминобензоат (глицерин-1-(4-аминобензоат). Он также позволяет обнаружить этил-4-аминобензоат (бензокаин, МНН), который может присутствовать в качестве примеси.

2.   ПРИНЦИП

Идентификацию осуществляют методом тонкослойной хроматографии на силикагеле с флуоресцентным индикатором и обнаружением свободной первичной аминогруппы по образованию диазокрасителя на пластинке.

3.   РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1.

Смесь растворителей: циклогексан/пропан-2-ол/стабилизированный дихлорметан 48/64/9 (об/об/об).

3.2.

Растворитель: петролейный эфир (40-60)/бензол/ацетон/раствор гидроксида аммония (минимум 25 % NH3): 35/35/35/1 (об/об/об/об).

3.3.

Разработка решения

:

(а)

нитрит натрия: 1 г в 100 мл 1 М соляной кислоты (приготовляют непосредственно перед применением);

(б)

2-нафтол: 0,2 г в 100 мл 1 М гидроксида калия.

3.4.

Стандартные решения:

альфа-моноглицерил-4-аминобензоат: 0,05 г в 100 мл смешанного растворителя 3.1;

этил-4-аминобензоат: 0,05 г в 100 мл смешанного растворителя 3.1.

3.5.

Силикагель 60 пластин F254 толщиной 0,25 мм, размером 200×200 мм.

4.   АППАРАТ

4.1.

Обычный аппарат для тонкослойной хроматографии.

4.2.

Ультразвуковой вибратор.

4.3.

Миллипоровый фильтр FH 0,5 мкм или аналогичный.

5.   ПОРЯДОК

5.1. Базовые приготовления

Взвешивают 1,5 г анализируемого продукта в мерной колбе с пробкой емкостью 10 мл. Доведите до метки растворителем 3.1. Закрывают пробкой и оставляют на один час при комнатной температуре в ультразвуковом вибраторе (4.2). Фильтруют через фильтр Millipore (4.3) и используют фильтрат для хроматографии.

5.2. Тонкослойная хроматография

Нанесите по 10 мкл раствора образца (5.1) и каждого стандартного раствора (3.4) на планшет (3.5).

Хроматограмму разводят на высоту 150 мм в емкости, предварительно насыщенной растворителем. 3.2. Дайте пластине высохнуть при температуре окружающей среды.

5.3. Разработка

5.3.1.

Наблюдайте за пластинкой в ​​УФ-свете с длиной волны 254 нм.

5.3.2.

Опрыскайте полностью высохшую пластинку раствором 3.3 (а).

Дать высохнуть при комнатной температуре в течение 1 минуты и немедленно опрыскать раствором 3.3 (b).

Высушите пластинку в духовке при температуре 60 oC. Пятна имеют оранжевый цвет. Альфа-моноглицерил-4-аминобензоат: РФ 0,07; этил-4-аминобензоат: RF 0,55.

Б.   ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1.   ОБЪЕМ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод определяет альфа-моноглицерил-4-аминобензоат. Он также определит этил-4-аминобензоат. Он не может определить более 5 % (м/м) альфа-моноглицерил-4-аминобензоата и 1 % (м/м) этил-4-аминобензоата.

2.   ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание альфа-моноглицерил-4-аминобензоата и этил-4-аминобензоата, измеренное этим методом, выражают в процентах по массе (% масс.) продукта.

3.   ПРИНЦИП

Анализируемый продукт суспендируют в метаноле и после соответствующей обработки образца его определяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

4.   РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны иметь аналитическую чистоту и, при необходимости, быть пригодными для ВЭЖХ.

4.1.

Метанол.

4.2.

Дигидрогенортофосфат калия (KH2PO4).

4.3.

Цинк ди(ацетат) (Zn(CH3COO)2 · 2H2O).

4.4.

Уксусная кислота

. 4.5.

Гексацианоферрат тетракалия, (K4(Fe(CN)6) · 3H2O).

4.6.

Этил 4-гидроксибензоат.

4.7.

Альфа-моноглицерил-4-аминобензоат.

4.8.

Этил 4-аминобензоат.

4.9.

Фосфатный буферный раствор (0,02 М): 2,72 г дигидронортофосфата калия (4.2) растворяют в одном литре воды.

4.10.

Элюент: фосфатный буферный раствор (4.9)/метанол (4.1) 61/39 (по объему).

Состав подвижной фазы может быть изменен для достижения коэффициента разрешения R ≥ 1,5.

где

Р1 и Р2

"="

время удерживания пиков в минутах,

П1 и П2

"="

ширина пика на половине высоты, в миллиметрах,

д'

"="

скорость диаграммы в миллиметрах в минуту.

4.11.

Исходный раствор альфа-моноглицерил-4-аминобензоата: точно взвесьте около 40 мг альфа-моноглицерил-4-аминобензоата и поместите его в градуированную колбу емкостью 100 мл. Растворяют в 40 мл метанола (4.1). Доведите до метки буферным раствором (4.9) и перемешайте.

4.12.

Исходный раствор этил-4-аминобензоата: точно взвесьте около 40 мг этил-4-аминобензоата и поместите его в градуированную колбу емкостью 100 мл. Растворяют в 40 мл метанола (4.1). Доведите до метки буферным раствором (4.9) и перемешайте.

4.13.

Раствор внутреннего стандарта: точно взвешивают около 50 мг этил-4-гидроксибензоата (4.6), переносят в стандартную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 40 мл метанола (4.1), доводят до метки буферным раствором (4.9) и перемешивают. .

4.14.

Стандартные растворы: приготовьте четыре стандартных раствора, растворив их в 100 мл элюента (4.10) в соответствии со следующей таблицей:

Стандартное решение

Альфа-моноглицерил 4-аминобензоат

Этил 4-аминобензоат

Этил 4-гидроксибензоат

(мкг/мл) (1)

мл (4,11) (1)

(мкг/мл) (1)

мл (4,12)

(мкг/мл) (1)

мл (4,13)

я

8

2

8

2

50

10

II

16

4

12

3

50

10

III

24

6

16

4

50

10

IV

40

10

20

5

50

10

4.15

Раствор Карреза I: 26,5 г гексацианоферрата тетракалия (4.5) растворить в воде и довести до объема 250 мл.

4.16.

Раствор Карреза II: 54,9 г диацетата цинка (4.3) и 7,5 мл уксусной кислоты (4.4) растворяют в воде и доводят объем до 250 мл.

4.17.

Merck Lichrosorb RP-18 или аналогичный со средним размером частиц 5 мкм.

5.   АППАРАТ

5.1.

Обычное лабораторное оборудование.

5.2.

Высокопроизводительное хроматографическое оборудование с УФ-детектором с переменной длиной волны и термостатированной камерой, настроенной на температуру 45 oC.

5.3.

Колонка из нержавеющей стали: длина: 250 мм; внутренний диаметр: 4,6 мм; упаковка: Лихросорб РП — 18 (4,17).

5.4.

Ультразвуковая ванна.

6.   ПОРЯДОК

6.1. Базовые приготовления

6.1.1.

Точно взвешивают около 1 г образца в стакан вместимостью 100 мл и добавляют 10 мл метанола (4.1).

6.1.2.

Поместите стакан в ультразвуковую ванну (5.4) на 20 минут для получения суспензии. Полученную таким образом суспензию количественно переносят в стандартную колбу вместимостью 100 мл с не более чем 75 мл элюента (4.10).

Добавляют последовательно по 1 мл раствора Карреза I (4.15) и 1 мл раствора Карреза II (4.16) и перемешивают после каждого добавления. Долейте до метки элюентом (4.10), повторно перемешайте и отфильтруйте через складчатую фильтровальную бумагу.

6.1.3.

С помощью пипетки переносят 3,0 мл фильтрата, полученного в 6.1.2, и 5,0 мл раствора внутреннего стандарта (4.13) в стандартную колбу вместимостью 50 мл. Доведите до метки элюентом (4.10) и перемешайте. Полученный таким образом раствор используют для проведения хроматографического анализа, описанного в 6.2.

6.2. Хроматография

6.2.1.

Доведите скорость потока подвижной фазы (4.10) до 1,2 мл/мин и установите температуру колонки на 45 oC.

6.2.2.

Установите детектор (5.2) на длину волны 274 нм.

6.2.3.

Микрошприцем вводят в хроматограф не менее двух раз по 20 мкл раствора (6.1.3) и измеряют площади пиков.

6.3. Калибровочная кривая

6.3.1.

Вводят по 20 мкл каждого стандартного раствора (4.14) и измеряют площадь пика.

6.3.2.

Для каждой концентрации рассчитывают соотношение площадей пиков альфа-моноглицерил-4-аминобензоата и площадей пиков внутреннего стандарта. Отложите это соотношение по оси абсцисс и по оси ординат отношения соответствующих масс.

6.3.3.

Действуйте таким же образом для этил-4-гидроксибензоата.

7.   РАСЧЕТ

7.1.

По калибровочной кривой, полученной в 6.3, отсчитывают соотношения масс (RP1, RP2), соответствующие соотношениям площадей пиков, рассчитанным в 6.2.3, где

РП1

"="

масса альфа-моноглицерил-4-аминобензоата/масса этил-4-гидроксибензоата,

рэп2

"="

масса этил 4-аминобензоата/масса этил 4-гидроксибензоата.

7.2.

Из полученных таким образом массовых соотношений рассчитайте содержание альфа-моноглицерил-4-аминобензоата и этил-4-аминобензоата в массовых процентах (% масс.) по формулам:

д

"="

количество этил 4-гидроксибензоата (внутренний стандарт), взвешенное, в миллиграммах, в 4,12,

п

"="

количество образца в граммах, взвешенное по 6.1.1.

8.   ПОВТОРЯЕМОСТЬ (2)

8.1.

При содержании альфа-моноглицерил-4-аминобензоата 5 % (м/м) разница между результатами двух параллельных определений, проведенных на одной и той же пробе, не должна превышать 0,25 %.

8.2.

При содержании этил-4-аминобензоата 1 % (м/м) разница между результатами двух параллельных определений, проведенных на одной и той же пробе, не должна превышать 0,10 %.

9.   ПРИМЕЧАНИЯ

9.1.

Перед проведением анализа проверьте, не содержит ли образец веществ, которые могут перекрываться с пиком внутреннего стандарта (этил-4-аминобензоата) на хроматограмме.

9.2.

Чтобы проверить отсутствие каких-либо помех, повторите определение, изменив долю метанола в подвижной фазе на 10 % относительно.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ХЛОРБУТАНОЛА

1.   ОБЪЕМ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод подходит для определения хлорбутанола (МНН) до максимальной концентрации 0,5 % (м/м) в любом косметическом продукте, кроме аэрозолей.

2.   ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание хлорбутанола, измеренное этим методом, выражается в процентах по массе (% м/м) продукта.

3.   ПРИНЦИП

После соответствующей обработки анализируемого продукта определение проводят газовой хроматографией с использованием 2,2,2-трихлорэтанола в качестве внутреннего стандарта.

4.   РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1.

Хлорбутанол (1,1,1-трихлор-2-метилпропан-2-ол).

4.2.

2,2,2-Трихлорэтанол.

4.3.

Абсолютный этанол.

4.4.

Стандартный раствор хлорбутанола: 0,025 г в 100 мл этанола (4,3) (м/об).

4.5.

Стандартный раствор 2,2,2-трихлорэтанола: 4 мг в 100 мл этанола (4.3) (масс./об.).

5.   АППАРАТ

5.1.

Обычное лабораторное оборудование.

5.2.

Газовый хроматограф с детектором электронов, Ni 63.

6.   ПОРЯДОК

6.1. Подготовка образца

Точно взвешивайте от 0,1 до 0,3 г (пг) образца. Поместить в мерную колбу емкостью 100 мл. Растворяют его в этаноле (4.3), добавляют 1 мл раствора внутреннего стандарта (4.5) и доводят до метки этанолом (4.3).

6.2. Условия газовой хроматографии

6.2.1.

Условия эксплуатации должны обеспечивать коэффициент разрешения R ≥ 1,5.

Где

Р1 и Р2

"="

время удерживания пиков в минутах,

П1 и П2

"="

ширина пика на половине высоты, в миллиметрах,

д'

"="

скорость диаграммы в миллиметрах в минуту.

6.2.2.

В качестве примера можно привести следующие условия эксплуатации, обеспечивающие требуемое разрешение:

Столбец

я

II

Материал

Стекло

Нержавеющая сталь

Длина

1,80 м

3 м

Диаметр

3 мм

3 мм

Стационарная фаза

10 % Carbowax 20 M TPA на сетке Gaschrom Q 80-100

5 % OV 17 на Chromosorb WAW DMCS 80-100 меш

Кондиционирование

2–3 дня при 190 oC

Температура:

— инжектор

200 оС

150 оС

- столбец

150 оС

100 оС

— детектор

200 оС

150 оС

Газ-носитель

Азот

Аргон/метан (95/5 об./об.)

Расход

35 мл/мин

35 мл/мин

6.3. Стандартная кривая

В пять мерных колб вместимостью 100 мл прибавляют по 1 мл стандартного раствора (4.5) и 0,2, 0,3, 0,4, 0,5 и 0,6 мл раствора 4.4 соответственно и доводят до метки. с этанолом (4.3) и перемешивают. Вводят по 1 мкл каждого из этих растворов в хроматограф в соответствии с условиями эксплуатации, описанными в 6.2.2, и строят калибровочную кривую, откладывая по оси абсцисс отношение массы хлорбутанола к массе 2,2,2-трихлорэтанола и по оси ординат - отношение соответствующих площадей пиков.

6.4.

Вводят 1 мкл раствора, полученного в 6.1, и действуют согласно условиям, описанным в 6.2.2.

7.   РАСЧЕТ

7.1.

Рассчитайте по стандартной кривой (6.3) количество «а», выраженное в мкг хлорбутанола, в растворе 6.1.

7.2.

Содержание хлорбутанола в пробе рассчитывают по формуле:

8.   ПОВТОРИМОСТЬ (3)

При содержании хлорбутанола 0,5 % (м/м) разница между результатами двух определений, параллельно проводимых на одной и той же пробе, не должна превышать 0,01 %.

Примечание

Если результат равен или превышает предельно допустимую концентрацию, необходимо проверить отсутствие помех.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ХИНИНА

А.   ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1.   ОБЪЕМ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод предназначен для обнаружения присутствия хинина в шампунях и лосьонах для волос.

2.   ПРИНЦИП

Идентификацию проводят методом тонкослойной хроматографии на силикагеле. Обнаружение хинина осуществляется по синей флуоресценции хинина в кислых условиях при длине волны 360 нм.

Для дальнейшего подтверждения флуоресценцию можно устранить парами брома, а пары аммиака вызовут появление желтоватой флюоресценции.

3.   РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1.

Пластины силикагеля, без индикаторов флуоресценции, толщиной 0,25 мм, 200×200 мм.

3.2.

Проявляющий растворитель: толуол/диэтиловый эфир/дихлорметан/диэтиламин/20/20/20/8 (об/об/об/об).

3.3.

Метанол.

3.4.

Серная кислота (96 %;

). 3.5.

Диэтиловый эфир.

3.6.

Проявитель: к 95 мл диэтилового эфира (3.5) в охлажденной емкости осторожно прибавляют 5 мл серной кислоты (3.4).

3.7.

Бром.

3.8.

Раствор гидроксида аммония (28 %;

). 3.9.

Хинин безводный.

3.10.

Стандартный раствор: точно отвешивают около 100,0 мг безводного хинина (3.9) в стандартную колбу и растворяют в 100 мл метанола (3.3).

4.   АППАРАТ

4.1.

Обычное оборудование для тонкослойной хроматографии.

4.2.

Ультразвуковая ванна.

4.3.

Фильтр Millipore, FH 0,5 мкм или эквивалентный с подходящим фильтрующим оборудованием.

5.   ПОРЯДОК

5.1. Подготовка образца

Точно взвешивают пробу, которая может содержать примерно 100 мг хинина, в стандартную колбу вместимостью 100 мл, растворяют и доводят до метки метанолом (3.3).

Закрывают колбу пробкой и оставляют на один час при комнатной температуре в ультразвуковом вибраторе (4.2). Фильтруют (4.3) и используют фильтрат для хроматографии.

5.2. Тонкослойная хроматография

Нанесите 1,0 мкл стандартного раствора (3.10) и 1,0 мкл раствора образца (5.1) на пластинку с силикагелем (3.1). Разверните хроматограмму на расстоянии 150 мм, используя растворитель 3.2. в резервуаре, предварительно насыщенном растворителем (3.2).

5.3. Разработка

5.3.1.

Высушите пластину при комнатной температуре.

5.3.21.

Опрыскивание реагентом 3.6.

5.3.3.

Оставьте пластину сохнуть на один час при комнатной температуре.

5.3.4.

Наблюдайте под светом УФ-лампы, настроенной на длину волны 360 нм. Хинин выглядит как флуоресцентное ярко-синее пятно.

В качестве примера в таблице ниже приведены значения RF основных алкалоидов, родственных хинину, при обработке растворителем 3.2.

Алкалоид

РФ

Хинин

0,20

Хинидин

0,29

цинхонин

0,33

цинхонидин

0,27

Гидрохинидин

0,17

5.3.5.

Для дальнейшего подтверждения присутствия хинина пластинку подвергают воздействию паров брома примерно на один час (3.7). Флуоресценция исчезает. Когда та же пластинка подвергается воздействию паров аммиака (3.8), пятна снова приобретают коричневый цвет, а при повторном исследовании пластинки в УФ-свете с длиной волны 360 нм можно наблюдать желтоватую флуоресценцию.

Предел обнаружения: 0,1 мкг хинина.

Б.   ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1.   ОБЪЕМ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод описывает определение хинина. Его можно использовать для определения максимально допустимой концентрации 0,5 % (м/м) в шампунях и 0,2 % в лосьонах для волос.

2.   ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание хинина, определенное этим методом, выражается в процентах по массе (% м/м) продукта.

3.   ПРИНЦИП

После соответствующей обработки анализируемого продукта определение проводят с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

4.   РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты и пригодны для ВЭЖХ.

4.1.

Ацетонитрил.

4.2.

Дигидрогенортофосфат калия (KH2PO4).

4.3.

Ортофосфорная кислота (85 %;

). 4.4.

Тетраэтиламмония бромид.

4.5.

Хинин безводный.

4.6.

Метанол.

4.7.

Раствор ортофосфорной кислоты (0,1 М): отвешивают 11,53 г ортофосфорной кислоты (4.3) и растворяют в 1000 нл воды в мерной колбе.

4.8.

Раствор дигидронортофосфата калия (0,1 М): отвешивают 13,6 г дигидронортофосфата калия (4.2) и растворяют в 1000 мл воды в мерной колбе.

4.9.

Раствор тетраметиламмония бромида: 15,40 г тетраметиламмония бромида (4.4) растворяют в 1000 мл воды в мерной колбе.

4.10

Элюент: ортофосфорная кислота (4.7)/дигидронортофосфат калия (4.8)/бромид тетраметиламмония (4.9)/вода/ацетонитрил (4.1) 10/50/100/340/90 (об/об/об/об/об).

Состав этой подвижной фазы может быть изменен для достижения коэффициента разрешения R ≥ 1,5.

где

Р1 и Р2

"="

время удерживания пиков в минутах,

П1 и П2

"="

ширина пика на половине высоты, в миллиметрах,

д'

"="

скорость диаграммы в миллиметрах в минуту.

4.11.

Кремнезем, обработанный октадецилсиланом, 10 мкм.

4.12.

Стандартные растворы: точно отвешивают приблизительно 5,0, 10,0, 15,0 и 20,0 мг соответственно хинина безводного (4.5) в набор стандартных колб вместимостью 100 мл. Доводят до метки метанолом (4,6) и встряхивают содержимое колб до растворения хинина. Отфильтруйте каждый образец через фильтр 0,5 мкм.

5.   АППАРАТ

5.1.

Обычное лабораторное оборудование.

5.2.

Ультразвуковая ванна.

5.3.

Высокоэффективное жидкостное хроматографическое оборудование с детектором с переменной длиной волны.

5.4.

Колонка: длина: 250 мм; внутренний диаметр: 4,6 мм; наполнитель: диоксид кремния (4.11).

5.5.

Фильтр Millipore FH 0,5 мкм или эквивалентный с подходящим фильтрующим устройством.

6.   ПОРЯДОК

6.1. Базовые приготовления

В стандартную колбу вместимостью 100 мл точно отвешивают количество продукта, достаточное для содержания 10,0 мг безводного хинина, добавляют 20 мл метанола (4.6) и помещают колбу в ультразвуковую ванну (5.2) на 20 мин. Доведите до метки метанолом (4.6). Перемешайте раствор и затем отфильтруйте аликвоту (5,5).

6.2. Хроматография

Скорость потока: 1,0 мл/мин.

Длина волны детектора (5,3): 332 нм.

Объем инъекции: 10 мкл фильтрованного раствора (6.1).

Измерение: площадь пика.

6.3. Калибровочная кривая

Вводят не менее трех раз по 10,0 мкл каждого раствора сравнения (4.12), измеряют площадь пиков и рассчитывают среднюю площадь при каждой концентрации.

Создайте калибровочную кривую и убедитесь, что она прямолинейна.

7.   РАСЧЕТ

7.1.

По калибровочной кривой (6.3) определяют количество в мкг безводного хинина, присутствующего в вводимом объеме (6.2).

7.2.

Концентрацию безводного хинина в образце, выраженную в массовых процентах (% м/м), получают по следующей формуле:

где

Б

- количество безводного хинина в микрограммах, определенное в 10 мкл отфильтрованного раствора (6.1).

А

– масса образца в граммах (6.1).

8.   ПОВТОРИМОСТЬ (4)

При содержании безводного хинина 0,5 % (м/м) разница между результатами двух определений, выполненных параллельно на одной и той же пробе, не должна превышать 0,02 %.

При содержании безводного хинина 0,2 % (м/м) разница между результатами двух определений, выполненных параллельно на одной и той же пробе, не должна превышать 0,01 %.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ НЕОРГАНИЧЕСКИХ СУЛЬФИТОВ И СУЛЬФИТОВ ВОДОРОДА

ОБЪЕМ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Метод описывает идентификацию и определение неорганических сульфитов и гидросульфитов в косметических продуктах. Он применим только к продуктам, имеющим водную или спиртовую фазу и для концентраций диоксида серы до 0,2 %.

А.   ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1.   ПРИНЦИП

Пробу нагревают в соляной кислоте, и выделившийся диоксид серы идентифицируют либо по запаху, либо по воздействию на индикаторную бумагу.

2.   РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

2.1.

Соляная кислота (4 М).

2.2.

Крахмальная бумага с йодатом калия или другая подходящая альтернатива.

3.   АППАРАТ

3.1.

Обычное лабораторное оборудование.

3.2.

Колба (25 мл) снабжена коротким обратным холодильником.

4.   ПОРЯДОК

4.1.

Поместите около 2,5 г образца в колбу (3.2) с 10 мл соляной кислоты (2.1).

4.2.

Перемешать и нагреть до кипения.

4.3.

Выделение диоксида серы проверяют по запаху или индикаторной бумаге (2.2).

Б.   ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1.   ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание сульфита или гидросульфита в образце, определенное данным методом, выражается в процентах по массе диоксида серы.

2.   ПРИНЦИП

После подкисления пробы выделившийся диоксид серы перегоняют в раствор перекиси водорода. Образовавшуюся серную кислоту титруют стандартизированным раствором гидроксида натрия.

3.   РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1.

Перекись водорода 0,2 % (м/об). Готовьте ежедневно.

3.2.

Ортофосфорная кислота (

). 3.3.

Метанол.

3.4.

Натрия гидроксид (0,01 М) стандартизированный раствор.

3.5.

Азот.

3.6.

Индикатор: смесь 1:1 (по объему) метилового красного (0,03% по объему в этаноле) и метиленового синего (0,05% по объему в этаноле). Отфильтруйте раствор.

4.   АППАРАТ

4.1.

Обычное лабораторное оборудование.

4.2.

Дистилляционный аппарат (см. рисунок).

5.   ПОРЯДОК

5.1.

Точно взвесьте около 2,5 г образца и поместите его в перегонную колбу А (см. рисунок).

5.2.

Добавьте 60 мл воды и 50 мл метанола (3.3) и перемешайте.

5.3.

В перегонный приемник Д (см. рисунок) поместите 10 мл перекиси водорода (3.1), 60 мл воды и несколько капель индикатора (3.6). Добавьте несколько капель гидроксида натрия (3.4), пока индикатор не станет зеленым.

5.4.

Повторите 5.3 для промывочной бутыли E (см. рисунок).

5.5.

Соберите аппарат и доведите поток азота (3,5) примерно до 60 пузырьков в минуту.

5.6.

Из воронки в перегонную колбу А переливают 15 мл ортофосфорной кислоты (3.2).

5.7.

Быстро нагрейте до кипения, а затем осторожно варите в течение 30 минут.

5.8.

Отсоедините дистилляционный приемник D. Промойте трубку и затем титруйте раствором гидроксида натрия (3.4), пока индикатор не станет зеленым (3.6).

6.   РАСЧЕТ

Массовое содержание сульфита или сероводорода в пробе рассчитывают по выражению:

где

М

"="

молярная концентрация раствора гидроксида натрия (3.4),

В

"="

объем гидроксида натрия (3.4), необходимый для титрования (5.8), в миллилитрах,

м

"="

масса образца (5.1) в граммах.

7.   ПОВТОРИМОСТЬ (5)

При содержании диоксида серы 0,2 % по массе разница между двумя параллельными определениями, выполненными на одной и той же пробе, не должна превышать 0,006 %.

Аппарат для перегонки диоксида серы по Таннеру

Все размеры в мм

ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ХЛОРАТОВ ЩЕЛОЧНЫХ МЕТАЛЛОВ

ОБЪЕМ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Метод описывает идентификацию и определение хлоратов в зубных пастах и ​​других косметических продуктах.

А.   ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1.   ПРИНЦИП

Хлораты отделяются от других галатов с помощью тонкослойной хроматографии и идентифицируются путем окисления йодида с образованием йода.

2.   РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

2.1.

Стандартные растворы: водные растворы хлората, бромата и иодата калия (0,2 % по объему), приготовленные свежеприготовленные.

2.2.

Растворитель для проявки: раствор аммиака (28% по объему), ацетон/бутанол (60/130/30 по объему).

2.3.

Йодид калия, водный раствор (5 % по объему).

2.4.

Раствор крахмала (от 1 до 5 % по объему).

2.5.

Соляная кислота (1 М).

2.6.

Готовые к использованию тонкослойные целлюлозные пластины (0,25 мм).

3.   АППАРАТ

Обычное оборудование для тонкослойной хроматографии.

4.   ПОРЯДОК

4.1.

Экстрагируйте около 1 г образца водой, отфильтруйте и разбавьте примерно до 25 мл.

4.2.

Нанесите 2 (мкл) на чашку (2.6) раствора (4.1) вместе с аликвотами по 2 мкл каждого из трех эталонных растворов (2.1).

4.3.

Помещают пластинку в резервуар и проявляют методом восходящей хроматографии примерно три четверти длины пластинки (2.6) растворителем 2.2.

4.4.

Выньте из резервуара и дайте растворителю испариться. (Примечание: это может занять до двух часов.)

4.5.

Опрыскайте пластину йодидом калия (2.3) и дайте высохнуть в течение примерно пяти минут.

4.6.

Опрыскайте пластину раствором крахмала (2.4) и дайте высохнуть в течение примерно пяти минут.

4.7.

Опрыскайте пластину соляной кислотой (2.5).

5.   ОЦЕНКА

Если присутствует хлорат, через полчаса появится синее пятно (возможно, коричневое) со значением RF примерно от 0,7 до 0,8.

Галаты

РФ

Йодат

от 0 до 0,2

Бромат

от 0,5 до 0,6

хлорат

от 0,7 до 0,8

Следует отметить, что броматы и йодаты дают немедленную реакцию. Следует соблюдать осторожность, чтобы не спутать пятна от броматов и хлоратов.

Б.   ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1.   ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание хлората в образце, определенное этим методом, выражается в процентах по массе хлората.

2.   ПРИНЦИП

Хлорат восстанавливается цинковым порошком в кислых условиях. Образовавшийся хлорид измеряют потенциометрическим титрованием раствором нитрата серебра. Аналогичное определение перед восстановлением допускает возможное присутствие галогенидов.

3.   РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1.

Уксусная кислота, 80 % (м/м).

3.2.

Цинковый порошок.

3.3.

Стандартный раствор нитрата серебра (0,1 М).

4.   АППАРАТ

4.1.

Обычное лабораторное оборудование.

4.2.

Потенциометр оснащен серебряным индикаторным электродом.

5.   ПОРЯДОК

5.1. Базовые приготовления

Точно взвесьте количество «m» массой примерно 2 г в центрифужной пробирке. Добавьте около 15 мл уксусной кислоты (3.1) и тщательно перемешайте. Подождите 30 минут и центрифугируйте 15 минут при 2000 об/мин. Перенесите надосадочный раствор в мерную колбу емкостью 50 мл. Повторите центрифугирование дважды, добавив к остатку 15 мл уксусной кислоты (3.1). Соберите раствор, содержащий хлорат, в ту же мерную колбу. Залейте уксусную кислоту до отметки (3.1).

5.2. Уменьшение хлората

Берут 20 мл раствора 5.1 и добавляют 0,6 г цинкового порошка (3.2). Доведите до кипения в колбе, снабженной трубкой-конденсатором. После 30-минутного кипячения охладить и профильтровать. Промойте колбу водой. Фильтруют и объединяют фильтрат с раствором.

5.3. Определение хлорида

Оттитровать 20 мл раствора 5.2 нитратом серебра (3.3), используя потенциометр (4.2). Титровать таким же образом 20 мл раствора 5.1 нитратом серебра (3.3).

Примечание: Если продукт содержит производные брома или йода, которые после восстановления могут выделять бромиды или йодиды, кривая титрования будет иметь несколько точек перегиба. В этом случае объем титруемого раствора (3.3), соответствующий хлориду, представляет собой разность между последней и предпоследней точками перегиба.

6.   РАСЧЕТ

Содержание хлората в пробе (% м/м) рассчитывают по формуле:

где

В

"="

объем раствора нитрата серебра (3.3), использованного для титрования раствора 5.2, в миллилитрах,

В'

"="

объем раствора нитрата серебра (3.3), израсходованный на титрование 20 миллилитров раствора 5.1, в миллилитрах,

М

"="

моляльность стандартного раствора нитрата серебра (3.3),

м

"="

масса образца, в граммах.

7.   ПОВТОРИМОСТЬ (6)

При содержании хлората от 3 до 5 % по массе разница между результатами двух определений, проводимых параллельно на одной и той же пробе, не должна превышать 0,07 % по массе.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЙОДАТА НАТРИЯ

ОБЪЕМ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Способ описывает процедуру идентификации и определения смываемости косметических средств, содержащих йодат натрия.

А.   ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1.   ПРИНЦИП

Йодат натрия отделяется от других галатов с помощью тонкослойной хроматографии и идентифицируется путем окисления йодида с образованием йода.

2.   РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

2.1.

Эталонные решения. Водные растворы хлората, бромата и иодата калия (0,01 % по объему) готовят свежеприготовленными.

2.2.

Проявочный растворитель.

Раствор аммиака (28% по объему)/ацетон/бутанол (60/130/30 по объему).

2.3.

Водный раствор йодида калия (5 % по объему).

2.4.

Раствор крахмала (от 1 до 5 % по объему).

2.5.

Соляная кислота (1 М).

3.   АППАРАТ

3.1.

Готовые к использованию целлюлозные пластинки для тонкослойной хроматографии (0,25 мм).

3.2.

Обычное оборудование для тонкослойной хроматографии.

4.   ПОРЯДОК

4.1.

Экстрагируйте около 1 г образца водой, отфильтруйте и разбавьте примерно до 10 мл.

4.2.

Нанесите 2 мкл этого раствора на нижнюю линию планшета (3.1) вместе с аликвотами по 2 мкл каждого из трех эталонных растворов (2.1).

4.3.

Помещают пластинку в резервуар и проявляют методом восходящей хроматографии примерно три четверти длины пластинки растворителем (2.2).

4.4.

Снимите пластину с резервуара и дайте растворителю испариться при температуре окружающей среды (Примечание: это может занять до двух часов).

4.5.

Опрыскайте пластину йодидом калия (2.3) и дайте высохнуть в течение примерно пяти минут.

4.6.

Обрызгайте крахмалом (2.4) и дайте высохнуть примерно пять минут.

4.7.

Наконец, опрыскайте соляной кислотой (2,5).

5.   ОЦЕНКА

Если присутствует йодат, сразу же появится синее пятно (цвет может быть коричневым или стать коричневым при стоянии) со значением RF примерно от 0 до 0,2.

Следует отметить, что броматы дают немедленные реакции при значениях RF примерно от 0,5 до 0,6, а хлораты - примерно через 30 минут при значениях RF от 0,7 до 0,8 соответственно.

Б.   ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1.   ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание йодата натрия, определенное этим методом, выражается в процентах по массе йодата натрия.

2.   ПРИНЦИП

Йодат натрия растворяют в воде и определяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, используя последовательно обращенно-фазовую колонку С18 и анионообменную колонку.

3.   РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны иметь аналитическую чистоту и особенно подходить для высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

3.1.

Соляная кислота (4 М).

3.2.

Сульфит натрия водный, 5 % по массе.

3.3.

Маточный раствор йодата натрия.

Приготовьте исходный раствор, содержащий 50 мг йодата натрия на 100 мл воды.

3.4.

Дигидронортофосфат калия.

3.5.

Гидрогенортофосфат динатрия · 2H2O.

3.6.

Подвижная фаза ВЭЖХ: растворяют 3,88 г дигидронортофосфата калия (3,4) и 1,19 г гидрогенортофосфата динатрия · 2H2O (3,5) в 1 литре воды.

pH полученного раствора составляет 6,2.

3.7.

Универсальная индикаторная бумага, pH 1-11.

4.   АППАРАТ

4.1.

Обычный лабораторный аппарат.

4.2.

Круглая фильтровальная бумага диаметром 110 мм, Schleicher and Schüll No 575, или эквивалент.

4.3.

Высокоэффективный жидкостный хроматограф с детектором с переменной длиной волны.

4.4.

Колонки: длина: 120 мм; внутренний диаметр: 4,6 мм; количество: два соединенных последовательно; первый столбец — Necleosil R 5 C18 или аналог; второй столбец — Видак(тм)-301-СБ или аналог.

5.   ПОРЯДОК

5.1. Базовые приготовления

5.1.1. Образцы жидкости (шампуни)

Точно взвесьте тестовую навеску массой около 1,0 г в калиброванной пробирке со стеклянной пробкой емкостью 10 мл или мерной колбе.

Залейте водой до отметки и перемешайте.

При необходимости профильтруйте раствор.

Определите иодат в растворе с помощью ВЭЖХ, как описано в разделе 5.2.

5.1.2. Твердые образцы (мыло)

Мелко разделите часть образца и точно взвесьте тестовую навеску массой примерно 1,0 г в мерный цилиндр со стеклянной пробкой емкостью 100 мл. Залейте до 50 мл водой и энергично встряхивайте в течение одной минуты. Центрифугируйте и профильтруйте через фильтровальную бумагу (4.1) или оставьте смесь постоять не менее одной ночи.

Энергично встряхните желеобразный раствор и профильтруйте его через фильтровальную бумагу (4.1).

Определите иодат в фильтрате с помощью ВЭЖХ, как описано в разделе 5.2.

5.2. Хроматография

Скорость потока: 1 мл/мин.

Длина волны детектора (4.2): 210 нм.

Объем инъекции: 10 мкл.

Измерение: площадь пика.

5.3. Калибровка

Пипеткой отнесите соответственно 1,0, 2,0, 5,0, 10,0 и 20,0 мл исходного раствора йодата натрия (3.3) в мерные колбы вместимостью 50 мл. Залейте до отметки и перемешайте.

Полученные таким образом растворы содержат 0,01, 0,02, 0,05, 0,10 и 0,20 мг йодата натрия на мл соответственно.

Вводят 10 мкл каждого стандартного раствора йодата в жидкостный хроматограф (4.2) и получают хроматограмму. Определите площадь пика йодата и постройте кривую, связывающую площадь пика с концентрацией йодата натрия.

6.   РАСЧЕТ

Рассчитайте содержание йодата натрия в массовых процентах (% м/м) по формуле:

где

м

— масса пробы (5.1), г,

В

— общий объем раствора пробы, миллилитры, полученный, как описано в 5.1,

с

— концентрация йодата натрия в миллиграммах на миллилитр, полученная по калибровочной кривой (5.3).

7.   ПОВТОРИМОСТЬ (7)

При содержании йодата натрия 0,1 % (м/м) разница между результатами двух параллельных определений, выполненных на одной и той же пробе, не должна превышать 0,002 %.

8.   ПОДТВЕРЖДЕНИЕ

8.1. Принцип

В подкисленном растворе косметического продукта йодат (IO3-) восстанавливают до йодида (I-) сульфитом и полученный раствор исследуют методом ВЭЖХ. Если пик, время удерживания которого соответствует времени удерживания йодата, исчезает после обработки сульфитом, то исходный пик, скорее всего, можно отнести к йодату.

8.2. Процедура

Внесите пипеткой порцию раствора пробы объемом 5 мл, полученную, как описано в разделе 5.1, в коническую колбу.

Доведите pH раствора до значения 3 или ниже с помощью соляной кислоты (3.1); универсальная индикаторная бумага (3.7).

Добавьте три капли раствора сульфита натрия (3.2) и перемешайте.

В жидкостный хроматограф (4.2) вводят порцию раствора объемом 10 мкл.

Сравните эту хроматограмму с хроматограммой, полученной, как описано в пункте 5, для той же пробы.

(1)  Эти значения даны в качестве ориентира и соответствуют точным массам 4,11, 4,12 и 4,13.

NB: Эти растворы можно приготовить другим способом.

(2)  ИСО 5725.

(3)  ИСО 5725.

(4)  ИСО 5725.

(5)  ИСО 5725.

(6)  ИСО 5725.

(7)  ИСО 5725.

Вершина