Директива Комиссии 90/207/EEC от 4 апреля 1990 г., вносящая поправки во Вторую директиву 82/434/EEC о сближении законодательства государства-члена ЕС, касающегося методов анализа, необходимых для проверки состава косметических продуктов.

*****

ДИРЕКТИВА КОМИССИИ

от 4 апреля 1990 г.

внесение изменений во Вторую директиву 82/434/EEC о сближении законодательства государства-члена, касающегося методов анализа, необходимых для проверки состава косметической продукции

(90/207/ЕЕС)

КОМИССИЯ ЕВРОПЕЙСКИХ СООБЩЕСТВ,

Принимая во внимание Договор о создании Европейского экономического сообщества,

Принимая во внимание, что Вторая Директива Комиссии 82/434/EEC от 14 мая 1982 г. о сближении законов государств-членов, касающихся методов анализа для проверки состава косметических продуктов (1), устанавливает общий метод анализа для идентификации и определения свободного формальдегида;

Принимая во внимание, что в свете новых научно-технических данных оказалось необходимым внести изменения в этот метод анализа;

Поскольку меры, предусмотренные настоящей Директивой, соответствуют мнению Комитета по адаптации к техническому прогрессу Директив по устранению технических барьеров в торговле в секторе косметической продукции,

ПРИНЯЛ НАСТОЯЩЕЕ РЕШЕНИЕ:

Статья 1

Глава IV Приложения к Директиве 82/434/EEC должна быть заменена текстом, изложенным в Приложении к ней.

Статья 2

Государства-члены должны ввести в действие законы, правила или административные положения, необходимые для соблюдения настоящей Директивы, не позднее 31 декабря 1990 г. Они должны немедленно проинформировать об этом Комиссию.

Положения, принятые в соответствии с первым параграфом, должны прямо относиться к настоящей Директиве.

Статья 3

Данная Директива адресована государствам-членам.

Совершено в Брюсселе 4 апреля 1990 года.

Для Комиссии

Карел ВАН МИЕРТ

Член Комиссии

(1) OJ № L 185, 30.6.1982, с. 1.

ПРИЛОЖЕНИЕ

'IV. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ СВОБОДНОГО ФОРМАЛЬДЕГИДА

1.2 // 1. // НАЗНАЧЕНИЕ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ // // Этот метод описывает идентификацию и два определения в зависимости от наличия или отсутствия доноров формальдегида. Это применимо ко всем косметическим продуктам. // 1.1. // Идентификация // 1.2. // Общее определение с помощью колориметрии пентан-2,4-диона // // Этот метод применяется, когда формальдегид используется отдельно или с другими консервантами, не являющимися донорами формальдегида. // // Если это не так и если результат превышает максимально допустимую концентрацию, необходимо использовать следующий метод подтверждения. // 1.3. // Определение в присутствии доноров формальдегида // // В указанном выше методе (1.2) в процессе получения доноры формальдегида расщепляются и приводят к слишком высоким результатам (связанный и полимеризованный формальдегид) // // Это Необходимо отделить свободный формальдегид методом жидкостной хроматографии. // 2. // ОПРЕДЕЛЕНИЕ // // Содержание свободного формальдегида в образце, определенное данным методом, выражается в процентах по массе. // 3. // ИДЕНТИФИКАЦИЯ // 3.1. // Принцип // // Свободный и связанный формальдегид в среде серной кислоты окрашивает реактив Шиффа в розовый или лиловый цвет. // 3.2. // Реагенты // // Все реагенты должны быть аналитической чистоты, а вода должна быть деминерализованной. // 3.2.1. // Фуксин; // 3.2.2. // Сульфит натрия, гидратированный при 7H2O; // 3.2.3. // Концентрированная соляная кислота (d=1,19); // 3.2.4. // Серная кислота, около 1М; // 3.2.5. // Реагент Шиффа: // // 100 мг фуксина (3.2.1) отвешивают в стакан и растворяют в 75 мл воды при температуре 80 °С. После охлаждения добавляют 2,5 г сульфита натрия (3.2.2). Довести до 100 мл. // // Использовать в течение двух недель. // 3.3. // Процедура // 3.3.1. // Взвесьте 2 г образца в стакане емкостью 10 мл. // 3.3.2. // Добавьте две капли серной кислоты (3.2.4) и 2 мл реактива Шиффа (3.2.5). Этот реагент при использовании должен быть абсолютно бесцветным. // // Встряхните и оставьте на пять минут. // 3.3.3. // Если в течение пяти минут наблюдается розовый или лиловый оттенок, то содержание формальдегида превышает 0,01 % и подлежит определению свободным и комбинированным методом (4) и, при необходимости, по методике (5) . // 4. // ОБЩЕЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ МЕТОДОМ ПЕНТАН-2,4-ДИОНОВОЙ КОЛОРИМЕТРИИ // 4.1. // Принцип // // Формальдегид реагирует с пентан-2,4-дионом в присутствии ацетата аммония с образованием 3,5-диацетил-1,4-дигидролутидина. Его экстрагируют бутан-1-олом и измеряют поглощение экстракта при 410 нм. // 4.2. // Реагенты // // Все реагенты должны быть аналитической чистоты, а вода должна быть деминерализованной. // 4.2.1. // Безводный ацетат аммония; // 4.2.2. // Концентрированная уксусная кислота, d204 = 1,05; // 4.2.3. // Пентан-2,4-дион, свежеперегнанный при пониженном давлении 25 мм рт.ст., 25° - он не должен проявлять поглощения при 410 нм. // 4.2.4. // Бутан-1-ол; // 4.2.5. // Соляная кислота, 1 М; // 4.2.6. // Соляная кислота, примерно 0,1 М; // 4.2.7. // Гидроксид натрия, 1 М; // 4.2.8. // Раствор крахмала свежеприготовленный согласно Европейской Фармакопее (1 г/50 мл воды), 2-е издание 1980 г., часть I-VII-1-1; // 4.2.9. // от 37 до 40 % формальдегида по массе; // 4.2.10 // Стандартный раствор йода, 0,05 М; // 4.2.11. // Стандартный раствор тиосульфата натрия, 0,1 М; // 4.2.12 // Пентан-2,4-дионовый реактив: // // В мерной колбе вместимостью 1 000 мл растворяют: // // - 150 г ацетата аммония (4.2.1), // // - 2 мл пентан-2,4-диона (4.2.3), // // - 3 мл уксусной кислоты (4.2.2). // // Доводят до 1 000 мл водой (pH раствора около 6,4). // // Этот реагент должен быть свежеприготовленным; // 4.2.13. // Реагент (4.2.12) без пентан-2,4-диона; // 4.2.14 // Формальдегид-эталон: маточный раствор // // Наливают 5 г формальдегида (4.2.9) в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем воды до 1000 мл. // // Определите крепость этого раствора следующим образом: // // Удалите 10,00 мл; добавляют 25,00 мл стандартного раствора йода (4.2.10) и 10,00 мл раствора гидроксида натрия (4.2.7). // // Дать постоять пять минут. // // Подкисляют 11,00 мл HCl (4.2.5) и определяют избыток йода стандартным раствором тиосульфата натрия (4.2.11), используя в качестве индикатора раствор крахмала (4.2.8). // // 1 мл 0,05 М йода (4.2.10) потребленного эквивалентен 1,5 мг формальдегида; // 4.2.15. // Стандарт формальдегида: разбавленный раствор // // Разбавьте исходный раствор формальдегида последовательно 1/20, а затем 1/100 водой. // // В 1 мл этого раствора содержится около 1 мг формальдегида. // // Вычисляем точное содержание. // 4.3. // Аппарат // 4.3.1. // Стандартная лабораторная аппаратура; // 4.3.2. // Фильтр фазового разделения Whatman 1 PS (или аналог); // 4.3.3. // Центрифуга; // 4.3.4. // Водяная баня с температурой 60 °C; // 4.3.5. // Спектрофотометр; // 4.3.6. // Стеклянные кюветы с оптическим путем 1 см. // 4.4. // Процедура // 4.4.1. // Раствор образца // // В мерную колбу емкостью 100 мл взвешивают с точностью до 0,001 г количество (в г) испытуемого образца, соответствующее предполагаемому количеству формальдегида, составляющему около 150 мг. // // Доведите до 100 мл водой и перемешайте (раствор S). // // (Проверьте, чтобы pH был близок к 6; в противном случае разбавьте раствором соляной кислоты (4.2.6).) // // В колбу Эрленмейера вместимостью 50 мл добавьте: // // - 10, 00 мл раствора S, // // - 5,00 мл пентан-2,4-дионового реагента (4.2.12). // // - вода деминерализованная до конечного объема 30 мл. // 4.4.2. // Эталонный раствор // // Возможные помехи из-за цвета фона в тестируемом образце устраняются использованием этого эталонного раствора: // // В колбу Эрленмейера емкостью 50 мл добавляют: // // - 10,00 мл S раствор, // // - 5,00 мл реагента (4.2.13), // // - вода деминерализованная до конечного объема 30 мл. // 4.4.3. // Холостой тест // // В колбу Эрленмейера вместимостью 50 мл добавляют: // // - 5,0 мл реагента пентан-2,4-диона (4.2.12), // // - деминерализованную воду до конечного результата объем 30 мл. // 4.4.4. // Определение // 4.4.4.1. // Взболтаем смеси из 4.4.1, 4.4.2 и 4.4.3. Погрузите колбы Эрленмейера в водяную баню при температуре 60°С ровно на 10 минут. Дайте остыть в течение двух минут в ванне с ледяной водой. // 4.4.4.2 // Переносят в делительные воронки вместимостью 50 мл, содержащие 10 мл бутан-1-ола (4.2.4). Промойте каждую колбу 3–5 мл воды. Энергично встряхивайте смесь ровно 30 секунд. Позвольте ему отделиться. // 4.4.4.3. // Фильтруем фазу бутан-1-ола в измерительные ячейки (4.3.2) через фазоразделительный фильтр. Также можно использовать центрифугирование (3000 g в течение пяти минут). // 4.4.4.4. // Измерьте оптическую плотность А1 при 410 нм экстракта раствора образца из 4.4.1 по сравнению с экстрактом раствора сравнения 4.4.2. // 4.4.4.5. // Аналогичным образом измерьте оптическую плотность А2 экстракта контрольного раствора из 4.4.3 по отношению к бутан-1-олу. // // N Б: Все эти операции необходимо провести в течение 25 минут с момента помещения колб Эрленмейера в водяную баню с температурой 60 °С. // 4.4.5. // Калибровочная кривая // 4.4.5.1. // В колбу Эрленмейера вместимостью 50 мл помещают: // // - 5,00 мл разбавленного стандартного раствора из 4.2.15, // // - 5,00 мл реагента пентан-2,4-диона ( 4.2.12), // // - вода деминерализованная до конечного объема 30 мл. // 4.4.5.2. // Продолжайте, как описано в 4.4.4, и измерьте поглощение бутан-1-ола (4.2.4). // 4.4.5.3. // Повторите процедуру с 10, 15, 20 и 25 мл разбавленного стандартного раствора (4.2.15). // 4.4.5.4. // Для получения нулевого значения (соответствующего окраске реагентов) действуйте, как в 4.4.4.5. // 4.4.5.5. // Постройте калибровочную кривую после вычитания нулевого значения из каждого значения оптической плотности, полученного в 4.4.5.1 и 4.4.5.3. Закон Бера действует до 30 мг формальдегида. // 4.5. // Расчеты // 4.5.1. // Вычтите A2 из A1 и по калибровочной кривой (4.4.5.5) определите количество формальдегида C в растворе пробы (4.4.1), мг. // 4.5.2. // Рассчитаем содержание формальдегида в образце (% м/м) по следующей формуле: 1.2.3 // // содержание формальдегида в % = // C 103 ; m 1.2 // // серия: // // m = масса тестовой порции в 9.

1.2 // 4.6. // Повторяемость (1) // // При содержании формальдегида 0,2 % разница между результатами двух определений, параллельно проводимых на одной и той же пробе, не должна превышать 0,005 % для определения пентан-2,4-дионом. колориметрия. // // Если определение свободного формальдегида приводит к результатам, превышающим максимальные концентрации, предусмотренные Директивой 76/768/EEC, т.е.: // // (a) между 0,05 % и 0,2 % в не -маркированный товар; // // (b) более 0,2 % в продукте, независимо от того, маркирован он или нет, необходимо применить процедуру, описанную в пункте 5 ниже. // 5. // ОПРЕДЕЛЕНИЕ В ПРИСУТСТВИИ ДОНОРОВ ФОРМАЛЬДЕГИДА // 5.1. // Принцип // // Отдельный формальдегид преобразуется в желтое производное лутидиновой кислоты путем реакции с пентан-2,4-дионом в постколоночном реакторе, и полученное производное детектируют по поглощению при 420 нм. // 5.2. // Реагенты // // Все реагенты должны быть аналитической чистоты, а вода должна быть деминерализованной. // 5.2.1. // вода класса ВЭЖХ или вода эквивалентного качества; // 5.2.2. // Безводный ацетат аммония; // 5.2.3. // Концентрированная уксусная кислота; // 5.2.4. // Пентан-2,4-дион (хранился при 4 °С); // 5.2.5. // Безводный динатрийфосфат; // 5.2.6. // 85 % ортофосфорная кислота (d = 1,7); // 5.2.7. // Метанол марки ВЭЖХ; // 5.2.8. // Дихлорметан; // 5.2.9. // от 37 до 40 % формальдегида по массе; // 5.2.10. // Гидроксид натрия, 1 М; // 5.2.11. // Соляная кислота, 1 М; // 5.2.12. // Соляная кислота, 0,002 М; // 5.2.13. // Раствор крахмала свежеприготовленный согласно Европейской Фармакопее (см. 4.2.8); // 5.2.14. // Стандартный раствор йода, 0,05 М; // 5.2.15. // Стандартный раствор тиосульфата натрия, 0,1 М; // 5.2.16. // Подвижная фаза: // // Водный раствор динатрийфосфата (5.2.5), 0,006 М, доведенный до pH 2,1 ортофосфорной кислотой (5.2.6); // 5.2.17. // Постколоночный реагент: // // В мерной колбе вместимостью 1000 мл растворяют: // // - 62,5 г ацетата аммония (5.2.2), // // - 7,5 мл уксусной кислоты (5.2) .3), // // - 5 мл пентан-2,4-диона (5.2.4). // // Доводят до 1000 мл водой (5.2.1). // // Храните этот реагент вдали от света. // // Срок хранения: максимум три дня при 25 °C. // // Никаких изменений цвета наблюдаться не должно; // 5.2.18. // Стандарт формальдегида: исходный раствор // // Наливают 10 г формальдегида (5.2.9) в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем воды до 1000 мл. // // Определите крепость этого раствора следующим образом: // // Удалите 5,00 мл; добавляют 25,00 мл стандартного раствора йода (5.2.14) и 10,00 мл раствора гидроксида натрия (5.2.10). // // Дать постоять пять минут. // // Подкисляют 11,00 мл HCl (5.2.11) и титруют избыток стандартного раствора йода стандартным раствором тиосульфата натрия (5.2.15), используя раствор крахмала (5.2.13) в качестве индикатора. // // 1 мл раствора йода (5.2.14)

(1) ИСО 5725.

// 5.2.19. // Стандарт формальдегида: разбавленный раствор // // Разбавляют исходный раствор до 1/100 от его первоначальной концентрации в подвижной фазе (5.2.16). // // 1 мл этого раствора содержит около 37 мг формальдегида. // // Вычисляем точное содержание. // 5.3. // Аппарат // 5.3.1. // Стандартная лабораторная аппаратура; // 5.3.2. // Насос для ВЭЖХ, без пульсаций; // 5.3.3. // Безпульсационный насос низкого давления для реагента (или второй насос ВЭЖХ); // 5.3.4. // Инъекционный клапан с петлей на 10 мл; // 5.3.5. // Реактор после колонки со следующими компонентами: // // + одна 1-литровая трехгорлая колба, // // + один нагреватель 1-литровой колбы, // // + две колонки Вигро с минимум 10 пластины, две с воздушным охлаждением, // // + трубка из нержавеющей стали (для теплообмена) 1,6 мм - внутренний диаметр 0,23 мм, длина = 400 мм, // // + трубка из тефлона 1,6 мм - внутренняя диаметр 0,30 мм, длина 5 м (французское вязание) см. Приложение 1), // // + один тройник без мертвого объема (Valco или аналогичный), // // + три соединения без мертвого объема // // Или: один постколоночный модуль Applied Biosystems PCRS 520 или эквивалент, оснащенный реактором объемом 1 мл; // 5.3.6. // Мембранный фильтр, размер пор 0,45 мм; // 5.3.7. // Патрон СЭП-ПАКР С18 или аналог; // 5.3.8. // Готовые к использованию колонки: // // - Bischoff Hypersil RP 18 (тип NC, артикул C 25.46 1805) (5 мм, длина = 250 мм, внутренний диаметр = 4,6 мм), // // - или Dupont, Zorbax ODS (5 мм, длина = 250 мм, внутренний диаметр = 4,6 мм), // // - или Phase SEP, spherisorb ODS 2 (5 мм, длина = 250 мм, внутренний диаметр = 4,6 мм) ; // 5.3.9 // Предварительная колонка // // Bischoff K1 Hypersil RP 18 (номер K1 G 6301 1805) // // (5 мм, длина = 10 мм или эквивалент). // 5.3.10 // Колонка и предколонка соединяются с помощью системы Ecotube (номер A 15020508 Bischoff) или эквивалентной. // 5.3.11. // Соберите аппарат (5.3.5), как показано на блок-схеме в Приложении 2. // // Соединения после значения впрыска должны быть как можно короче. В этом случае трубка из нержавеющей стали между выходом реактора и входом детектора предназначена для охлаждения смеси перед обнаружением, а температура в детекторе неизвестна, но постоянна; // 5.3.12. // УФ-видимый детектор; // 5.3.13. // Регистратор; // 5.3.14. // Центрифуга; // 5.3.15 // Ультразвуковая ванна; // 5.3.16. // Вибрационная мешалка (вортекс или аналог). // 5.4. // Процедура // 5.4.1. // Калибровочная кривая // // Получается путем построения графика высоты пика в зависимости от концентрации стандарта формальдегида: разбавленного. // // Готовят стандартные растворы, разбавляя эталонный раствор формальдегида (5.2.19) подвижной фазой (5.2.16): // // - 1,00 мл раствора (5.2.19), разбавленного до 20,00 мл (около 185 мг/100 мл) // // - 2,00 мл раствора (5.2.19), разбавленного до 20,00 мл (около 370 мг/100 мл) // // - 5,00 мл раствора (5.2.19) разбавляют до 25,00 мл (около 740 мг/100 мл) // // - 5,00 мл раствора (5.2.19) разбавляют до 20,00 мл (около 925 мг/100 мл)/ // Стандартные растворы выдерживаются в течение одного часа при лабораторной температуре и должны быть свежеприготовленными. // // Линейность калибровочной кривой достаточна для концентраций от 1,00 до 15,00 мг/мл. // 5.4.2. // Подготовка проб // 5.4.2.1. // Эмульсии (кремы, база под макияж, подводка для глаз) // // В закупоренную колбу емкостью 100 мл отвешивают с точностью до 0,001 г количество испытуемого образца (мг), соответствующее предполагаемому количеству 100 мг формальдегида. Добавляют 20,00 мл дихлорметана (5.2.8) и 20,00 мл соляной кислоты (5.2.12), тщательно отмерив. Смешивают вибрационной мешалкой (5.3.16) и с помощью ультразвуковой ванны (5.3.15). Разделяют две фазы центрифугированием (3000 g в течение двух минут). Тем временем промывают картридж (5.3.7) 2 мл метанола (5.2.7), затем обрабатывают 5 мл воды (5.2.1). // // Пропустите 4 мл водной фазы экстракта через кондиционированный картридж, отбросьте первые 2 мл и извлеките следующую фракцию. // 5.4.2.2. // Лосьоны, шампуни // // Отвешивают в закупоренной колбе емкостью 100 мл с точностью до 0,001 г количество испытуемого образца (мг), соответствующее предполагаемому количеству около 500 мг формальдегида. // // Доводят до 100 мл подвижной фазы (5.2.16). // // Фильтруют раствор через фильтр (5.3.6) и впрыскивают или пропускают его через картридж (5.3.7), кондиционированный, как раньше (5.4.2.1). Все растворы необходимо вводить сразу после приготовления. // 5.4.3. // Хроматографические условия // // - Расход подвижной фазы: 1 мл/мин, // // - Расход реагента: 0,5 мл/мин, // // - Общий расход на выходе из детектора: 1,5 мл/мин, // // - Вводимый объем: 10 мл, // // - Температура элюирования: В случае затрудненного разделения погрузите колонку в ванну с тающим льдом: подождите, пока температура стабилизируется (15-20 мин), // // - Температура постколоночной реакции: 100 °С, // // - Детектирование: 420 нм. // // Примечание: Вся хроматографическая система и постколонка после использования должны быть промыты водой (5.2.1). Если система не используется более двух дней, за этой промывкой следует промыть метанолом (5.2.7). Перед ремонтом системы пропустите через нее воду во избежание рекристаллизации. // 5.5. // Расчет // // Эмульсии: (5.4.2.1): // // Содержание формальдегида в % (м/м): 1.2.3.4 // // C ; 10-6; 100 5 м // = // C ; 10-4 5 м 1,2 // // Лосьоны, средства: // // В этом случае свяжите форму вепсом: 1.2.3.4 // // PS ; 10-6; 100 м // = // С ; 10-4 м 1,2 // // серия: // // m = масса анализируемой пробы в г (5.4.2.1), // // PS = концентрация формальдегида в мг/100 мл, считываемая по калибровочной кривой ( 5.4.1). // 5.6. // Повторяемость (1) // // При содержании формальдегида 0,05 % разница между результатами двух определений, параллельно проводимых на одной и той же пробе, не должна превышать 0,001 %. // // При содержании формальдегида 0,2 % разница между результатами двух определений, параллельно проводимых на одной и той же пробе, не должна превышать 0,005 %. эквивалентно 1,5 мг формальдегида;

(1) ИСО 5725.

Приложение 1

ИНСТРУКЦИЯ ПО «ФРАНЦУЗСКОМУ ВЯЗАНИЮ»

НЕОБХОДИМЫЕ АКСЕССУАРЫ

- Одна деревянная шпулька:

внешний диаметр 5 см с отверстием диаметром 1,5 см в центре. Вставьте четыре стальных гвоздя (как показано на рисунках 1 и 2). Расстояние между двумя гвоздями должно составлять 1,8 см и они должны находиться на расстоянии 0,5 см от лунки.

- одна жесткая игла (типа вязального крючка) для зацепления тефлоновой трубки,

- 5 м тефлоновой трубки диаметром 1,6 мм, внутренний диаметр 0,3 мм.

ПРОЦЕДУРА

Чтобы начать «французское вязание», тефлоновую трубку необходимо продеть сверху шпульки вниз через центральное отверстие (оставив около 10 см трубки выступающей из нижней части шпульки, чтобы можно было протянуть цепочку). в процессе вязания); затем поочередно намотайте трубку на четыре гвоздя, как показано на рисунке 3.

Верх и низ французской вязки будут защищены металлическими кольцами и прижимными винтами; будьте осторожны, чтобы не раздавить тефлон при затягивании. Оберните трубочку вокруг каждого гвоздя на второй оборот и сделайте «стежки» следующим образом:

- поднимите нижнюю трубку над верхней трубкой с помощью крюка (см. рисунок 4). Повторите этот процесс на каждом из гвоздей по порядку (1, 2, 3, 4 против часовой стрелки), пока не будет получено 5 м или желаемая длина вязания.

Оставьте около 10 см трубки, чтобы замкнуть цепочку. Проденьте трубку в каждую из четырех петель и осторожно потяните, чтобы закрыть конец цепочки.

Примечание: на рынке доступен французский трикотаж, изготовленный для постколонных реакторов (Supelco). Принципиальная схема шпульки

1.2.3 // Рисунок 1 Рисунок 2 // // Рисунок 3 Первая трубка Рисунок 4 Вторая трубка Чтобы сформировать «стежок», поднимите нижнюю трубку (сплошная линия) вверх над второй трубкой (пунктирная линия) Рисунок 5

Приложение 2

1.2 // 1 // = насос ВЭЖХ // 2 // = инжекторный клапан // 3 // = колонка с предварительной колонкой // 4 // = насос для реагентов // 5 // = тройник без мертвого объема // 5' // = Тройник (Vortex) // 6-6' // = Союз без мертвого объема // 7 // = 'Французское вязание' // 7' // = Реактор // 8 // = Трех- горловая колба с кипящей водой // 9 // = Нагреватель колбы // 10 // = Хладагент // 11 // = Трубка теплообменника из нержавеющей стали // 11' // = Теплообменник // 12 // = Видимый УФ-детектор // 13 // = постколонный модуль PCRS 520

5.3.5

5.3.6

Элюентные реагенты

Храните этот реагент вдали от света. //

Время хранения: максимум три дня при температуре 25*C. //

Никаких изменений цвета не должно наблюдаться;

5.2.18 .

Стандарт формальдегида: маточный раствор //

В мерную колбу вместимостью 1000 мл наливают 10 г формальдегида (5.2.9) и доводят объем воды до 1000 мл. //

Определите силу этого решения следующим образом: //

Удалить 5,00 мл; добавляют 25,00 мл стандартного раствора йода (5.2.14) и 10,00 мл раствора гидроксида натрия (5.2.10). //

Дать постоять пять минут. //

Подкисляют 11,00 мл HCl (5.2.11) и титруют избыток стандартного раствора йода стандартным раствором тиосульфата натрия (5.2.15), используя раствор крахмала (5.2.13) в качестве индикатора. //

1 мл раствора йода (5.2.14) эквивалентен 1,5 мг.

( 1 ) ИСО 5725 .

5.2.19 .

Стандарт формальдегида: разбавленный раствор //

Разбавьте исходный раствор до 1/100 от его первоначальной концентрации подвижной фазы (5.2.16). //

В 1 мл этого раствора содержится около 37 мг формальдегида. //

Рассчитайте точное содержание.

5.3 .

Аппарат

5.3.1 .

Стандартное лабораторное оборудование;

5.3.2 .

Насос для ВЭЖХ, без пульсаций;

5.3.3 .

Безпульсационный насос низкого давления для реагента (или второй насос для ВЭЖХ);

5.3.4 .

Инжекторный клапан с петлей 10*л;

5.3.5 .

Постколонный реактор со следующими компонентами: //

+ одна трехгорлая колба емкостью 1 литр, //

+ один подогреватель колбы объемом 1 литр, //

+ две колонки Вигро с минимум 10 тарелками, две с воздушным охлаждением, //

+ трубка из нержавеющей стали (для теплообмена) 1,6 мм _ внутренний диаметр 0,23 мм, длина = 400 мм, //

+ Тефлоновая трубка 1,6 мм _ внутренний диаметр 0,30 мм, длина 5 м (французское вязание) см. Приложение 1), //

+ один тройник без мертвого объема (Valco или аналогичный), //

+ три союза без мертвого объема //

Или: один постколоночный модуль Applied Biosystems PCRS 520 или эквивалент, оснащенный реактором объемом 1 мл;

5.3.6 .

Мембранный фильтр, размер пор 0,45 мкм;

5.3.7 .

Патрон СЭП-ПАКР С18 или аналогичный;

5.3.8 .

Готовые столбцы: //

_ Bischoff Hypersil RP 18 (тип NC, артикул C 25.46 1805) (5 *м, длина = 250 мм, внутренний диаметр = 4,6 мм), //

_ или Dupont, Zorbax ODS (5*м, длина = 250 мм, внутренний диаметр = 4,6 мм), //

_ или Phase SEP, сферосорб ODS 2 (5*м, длина = 250 мм, внутренний диаметр = 4,6 мм);

5.3.9

Предварительный столбец //

Bischoff K1 Hypersil RP 18 (артикул K1 G 6301 1805) //

(5*м, длина = 10 мм или эквивалент).

5.3.10

Колонка и предколонка соединяются с помощью системы Ecotube (номер A 15020508 Bischoff) или ее эквивалента.

5.3.11 .

Соберите аппарат (5.3.5) согласно структурной схеме приложения 2. //

Соединения после значения впрыска должны быть как можно короче. В этом случае трубка из нержавеющей стали между выходом реактора и входом детектора предназначена для охлаждения смеси перед обнаружением, а температура в детекторе неизвестна, но постоянна;

5.3.12 .

УФ-видимый детектор;

5.3.13 .

Регистратор;

5.3.14 .

Центрифуга;

5.3.15

Ультразвуковая ванна;

5.3.16 .

Вибрационная мешалка (vortex или аналогичная).

5.4 .

Процедура

5.4.1 .

Калибровочная кривая //

Это получается путем построения графика высоты пиков как функции концентрации стандартного формальдегида: разбавленного. //

Приготовьте стандартные растворы, разбавив эталонный раствор формальдегида (5.2.19) подвижной фазой (5.2.16): //

_ 1,00 мл раствора (5.2.19), разбавленного до 20,00 мл (около 185 г/100 мл) //

_ 2,00 мл раствора (5.2.19), разбавленного до 20,00 мл (около 370 г/100 мл) //

_ 5,00 мл раствора (5.2.19), разбавленного до 25,00 мл (около 740 г/100 мл) //

_ 5,00 мл раствора (5.2.19), разбавленного до 20,00 мл (около 925 г/100 мл) //

Стандартные растворы хранятся в течение одного часа при лабораторной температуре и должны быть свежеприготовленными. //

Линейность калибровочной кривой достаточна для концентраций от 1,00 до 15,00 г/мл.

5.4.2 .

Подготовка образцов

5.4.2.1 .

Эмульсии (кремы, база под макияж, подводки для глаз) //

В закупоренную колбу вместимостью 100 мл отвешивают с точностью до 0,001 г количество испытуемой пробы (мг), соответствующее предполагаемому количеству 100 г формальдегида. Добавляют 20,00 мл дихлорметана (5.2.8) и 20,00 мл соляной кислоты (5.2.12) в точном количестве. Перемешивают вибрационной мешалкой (5.3.16) и с помощью ультразвуковой ванны (5.3.15). Разделяют две фазы центрифугированием (3000 g в течение двух минут). Тем временем промойте картридж (5.3.7) 2 мл метанола (5.2.7), затем обработайте 5 мл воды (5.2.1). //

Пропустите 4 мл водной фазы экстракта через кондиционированный картридж, отбросьте первые 2 мл и извлеките следующую фракцию.

5.4.2.2 .

Лосьоны, шампуни //

В закупоренную колбу емкостью 100 мл отвешивают с точностью до 0,001 г количество испытуемой пробы (мг), соответствующее предполагаемому количеству около 500 г формальдегида. //

Доводят объем подвижной фазы до 100 мл (5.2.16). //

Отфильтруйте раствор через фильтр (5.3.6) и впрысните или пропустите его через картридж (5.3.7), кондиционированный, как раньше (5.4.2.1). Все растворы необходимо вводить сразу после приготовления.

5.4.3 .

Хроматографические условия //

_ Скорость потока подвижной фазы: 1 мл/мин, //

_ Расход реагента: 0,5 мл/мин, //

_ Общий расход на выходе детектора: 1,5 мл/мин, //

_ Впрыскиваемый объем: 10 *л, //

_ Температура элюирования: В случае затрудненного разделения погрузите колонку в ванну с тающим льдом: подождите, пока температура стабилизируется (15-20 мин), //

_ Температура постколоночной реакции: 100 *С, //

_ Обнаружение: 420 нм. //

Примечание: Вся хроматографическая система и постколонка после использования должны быть промыты водой (5.2.1). Если система не используется более двух дней, за этой промывкой следует промыть метанолом (5.2.7). Перед ремонтом системы пропустите через нее воду во избежание рекристаллизации.

5.5 .

Расчет //

Эмульсии: (5.4.2.1): //

Содержание формальдегида в % (м/м):

1.2.3.4 //

С 10-6 100 5 м

"="

С 10-4 5 м

1.2 // ******* ******** ** **** **** *** ******* *******

1.2.3.4 // * // 10-6 100 м

"="

С 10-4 м

1.2 // ***** * **** ** *** ****** ******** ** * * ************ ** *********** **

*г/100 мл считывают по калибровочной кривой (5.4.1).

5.6 .

Повторяемость ( 1 ) //

При содержании формальдегида 0,05 % разница между результатами двух параллельно проведенных определений на одной и той же пробе не должна превышать 0,001 %. //

При содержании формальдегида 0,2 % разница между результатами двух параллельно проведенных определений на одной и той же пробе не должна превышать 0,005 %. формальдегид;

( 1 ) ИСО 5725 .

Приложение 1

ИНСТРУКЦИЯ ПО «ФРАНЦУЗСКОМУ ВЯЗАНИЮ»

НЕОБХОДИМЫЕ АКСЕССУАРЫ

_ Одна деревянная шпулька:

внешний диаметр 5 см с отверстием диаметром 1,5 см в центре. Вставьте четыре стальных гвоздя (как показано на рисунках 1 и 2). Расстояние между двумя гвоздями должно составлять 1,8 см и они должны находиться на расстоянии 0,5 см от лунки.

_ одну жесткую иглу (типа крючка) для закрепления тефлоновой трубки,

_ 5 м тефлоновой трубки диаметром 1,6 мм, внутренний диаметр 0,3 мм.

ПРОЦЕДУРА

Чтобы начать «французское вязание», тефлоновую трубку необходимо продеть сверху шпульки вниз через центральное отверстие (оставив около 10 см трубки выступающей из нижней части шпульки, чтобы можно было протянуть цепочку). в процессе вязания); затем поочередно намотайте трубку на четыре гвоздя, как показано на рисунке 3.

Верх и низ французской вязки будут защищены металлическими кольцами и прижимными винтами; Будьте осторожны, чтобы не раздавить тефлон при затягивании. Оберните трубочку вокруг каждого гвоздя на второй оборот и сделайте «стежки» следующим образом:

_ поднимите нижнюю трубку над верхней трубкой с помощью крючка (см. Рисунок 4). Повторите этот процесс на каждом гвозде по порядку (1, 2, 3, 4 против часовой стрелки), пока не будет получено 5 м или желаемая длина вязания.

Оставьте около 10 см трубки, чтобы замкнуть цепочку. Проденьте трубку в каждую из четырех петель и осторожно потяните, чтобы закрыть конец цепочки.

Примечание: на рынке доступен французский трикотаж, изготовленный для постколонных реакторов (Supelco).

Принципиальная схема шпульки

1.2.3Рисунок 1 Рисунок 2

Рисунок 3. Первая трубка. Рисунок 4. Вторая трубка. Чтобы сформировать «стежок», поднимите нижнюю трубку (сплошная линия) вверх над второй трубкой (пунктирная линия). Рисунок 5.

Приложение 2

1.21

= насос для ВЭЖХ

2

= Инжекторный клапан

3

= Столбец с предварительным столбцом

4

= Реагентный насос

5

= тройник без мертвого объема

5'

= Тройник (Vortex)

6-6 минут

= Союз без мертвого объема

7

= "Французское вязание"

7'

= Реактор

8

= Трехгорлая колба с кипятком

9

= Нагреватель колбы

10

= Охлаждающая жидкость

11

= Трубка теплообменника из нержавеющей стали

11 минут

= Теплообменник

12

= Видимый УФ-детектор

13

= постколоночный модуль PCRS 520

5.3.5

5.3.6

Элюентные реагенты