Пятая Директива Комиссии 93/73/EEC от 9 сентября 1993 г. о методах анализа, необходимых для проверки состава косметических продуктов.

ПЯТАЯ ДИРЕКТИВА КОМИССИИ 93/73/EEC от 9 сентября 1993 г. о методах анализа, необходимых для проверки состава косметических продуктов.

КОМИССИЯ ЕВРОПЕЙСКИХ СООБЩЕСТВ,

Принимая во внимание Договор о создании Европейского экономического сообщества,

Принимая во внимание Директиву Совета 76/768/EEC от 27 июля 1976 г. о сближении законов государств-членов, касающихся косметической продукции (1), с последними поправками, внесенными Директивой 93/35/EEC (2), и в частности Статью 8 (1) из них,

Принимая во внимание, что Директива 76/768/EEC предусматривает официальное тестирование косметической продукции с целью обеспечения соблюдения условий, установленных положениями Сообщества относительно состава косметической продукции;

Принимая во внимание, что все необходимые методы анализа должны быть разработаны как можно быстрее; тогда как четыре шага уже были предприняты Директивой Комиссии 80/1335/EEC (3) с поправками, внесенными Директивой 87/143/EEC (4), Директивой Комиссии 82/434/EEC (5) с поправками, внесенными Директивой 90/207 /EEC (6) и Директивы Комиссии 83/514/EEC (7) и 85/490/EEC (8); тогда как идентификация и определение нитрата серебра, идентификация и определение нитрата серебра, идентификация и определение дисульфида селена в шампунях против перхоти, определение растворимого бария и растворимого стронция в пигментах в виде солей или озер, идентификация и определение бензилового спирта, идентификация циркония и определение циркония, алюминия и хлора в неаэрозольных антиперспирантах, а также идентификация и определение гексамидина, дибромгексамидина, дибромпропамидина и хлоргексидина составляют пятый этап;

Поскольку меры, предусмотренные настоящей Директивой, соответствуют мнению Комитета по адаптации Директивы 76/768/ЕЕС к техническому прогрессу,

ПРИНЯЛ НАСТОЯЩУЮ ДИРЕКТИВУ:

Статья 1

Государства-члены должны принять все необходимые меры для обеспечения того, чтобы во время официального тестирования косметической продукции:

- идентификация и определение нитрата серебра,

- идентификация и определение дисульфида селена в шампунях против перхоти,

- определение растворимого бария и растворимого стронция в пигментах в виде солей или озер,

- идентификация и определение бензилового спирта,

- идентификация циркония, а также определение циркония, алюминия и хлора в неаэрозольных антиперспирантах,

- идентификация и определение гексамидина, дибромгексамидина, дибромпропамидина и хлоргексидина,

проводится в соответствии с методами, описанными в Приложении.

Статья 2

1. Государства-члены должны ввести в действие законы, правила или административные положения, необходимые для соблюдения настоящей Директивы, не позднее 30 сентября 1994 г. Они должны немедленно проинформировать об этом Комиссию.

Когда государства-члены ЕС принимают эти положения, они должны содержать ссылку на настоящую Директиву или сопровождаться такой ссылкой во время их официальной публикации. Порядок такой ссылки должен быть принят государствами-членами.

2. Государства-члены ЕС должны сообщить Комиссии положения национального законодательства, которые они принимают в области, охватываемой настоящей Директивой.

Статья 3

Настоящая Директива адресована государствам-членам

Совершено в Брюсселе 9 сентября 1993 года.

Для Комиссии

Кристиана СКРИВЕНЕР

Член Комиссии

(1) ОЖ № L 262, 27.9.1976, с. 169.

(2) ОЖ № L 151, 23.6.1993, с. 32.

(3) ОЖ № L 383, 31.12.1980, с. 27.

(4) ОЖ № L 57, 27.2.1987, с. 56.

(5) ОЖ № L 185, 30.6.1982, с. 1.

(6) ОЖ № L 108, 28.4.1990, с. 92.

(7) ОЖ № L 291, 24.10.1983, с. 9.

(8) ОЖ № L 295, 7.11.1985, с. 30.

ПРИЛОЖЕНИЕ

ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ НИТРАТА СЕРЕБРА В КОСМЕТИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ

А. Идентификация

1. Область применения и применение.

Этот метод описывает идентификацию нитрата серебра как серебра в водных косметических продуктах.

2. Принцип

Серебро идентифицируется по характерному белому осадку, образующемуся с ионами хлорида.

3. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Раствор соляной кислоты, 2 М

3.2. Раствор аммиака: концентрированный раствор гидроксида аммония (d20 = 0,88 г/мл) разбавить равным количеством воды и перемешать.

3.3. Раствор азотной кислоты, 2 М

4. Аппарат

4.1. Обычное лабораторное оборудование

4.2. Центрифуга

5. Процедура

5.1. Примерно к 1 г образца в центрифужной пробирке добавляют по каплям 2 М раствор хлористоводородной кислоты (3.1) до полного осаждения; перемешать и центрифугировать.

5.2. Надосадочную жидкость сливают, а осадок промывают один раз пятью каплями холодной воды. Откажитесь от стирки.

5.3. Добавьте в центрифужную пробирку количество воды, равное объему осадка. Нагрейте до кипения и перемешайте.

5.4. Центрифуга горячая; отбросьте надосадочную жидкость.

5.5. К осадку добавляют несколько капель раствора аммиака (3.2); перемешать и центрифугировать.

5.6. К одной капле надосадочной жидкости на предметном стекле добавляют несколько капель 2 М раствора азотной кислоты (3.3).

5.7. Белый осадок указывает на присутствие серебра.

Б. Решимость

1. Область применения и применение.

Этот метод пригоден для определения нитрата серебра в виде серебра в косметических продуктах, предназначенных для окрашивания ресниц или бровей.

2. Принцип

Серебро в продукте определяют методом атомно-абсорбционной спектрометрии.

3. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Раствор азотной кислоты, 0,02 М

3.2. Серебряные стандартные решения

3.2.1. Исходный стандартный раствор серебра, 1000 мг/мл в 0,5 М растворе азотной кислоты («SpectrosoL» или эквивалент)

3.2.2. Стандартный раствор серебра, 100 мг/мл: переносят пипеткой 10 мл исходного стандартного раствора серебра (3.2.1) в мерную колбу вместимостью 100 мл. Доводят до объема 0,02 М раствором азотной кислоты (3.1) и перемешивают. Этот стандартный раствор следует готовить свежеприготовленным и хранить в бутылке из темного стекла.

4. Аппарат

4.1. Обычное лабораторное оборудование

4.2. Атомно-абсорбционный спектрофотометр с серебряной лампой с полым катодом.

5. Процедура

5.1. Базовые приготовления

Точно взвесьте примерно 0,1 г (м грамм) однородного образца продукта. Количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1 л, доводят до объема 0,02 М раствором азотной кислоты (3.1) и перемешивают.

5.2. Условия атомно-абсорбционной спектрометрии

Пламя: воздух-ацетилен

Длина волны: 338,3 нм

Коррекция фона: да

Состояние топлива: бедное; для максимального поглощения потребуется оптимизация высоты горелки и условий подачи топлива.

5.3. Калибровка

5.3.1. В ряд мерных колб вместимостью 100 мл пипеткой переносят по 1,0, 2,0, 3,0, 4,0 и 5,0 мл стандартного раствора серебра (3.2.2). В каждую колбу доводят до объема 0,02 М раствор азотной кислоты (3.1) и перемешивают. Эти растворы содержат 1,0, 2,0, 3,0, 4,0 и 5,0 мг серебра на миллилитр соответственно.

5.3.2. Измерьте оптическую плотность 0,02 М раствора азотной кислоты (3.1) и используйте полученное значение в качестве нулевой концентрации серебра для построения калибровочной кривой. Измерьте оптическую плотность каждого калибровочного стандарта серебра (5.3.1). Постройте калибровочную кривую, связывающую значения оптической плотности с концентрацией серебра.

5.4. Определение

Измерьте оптическую плотность раствора образца (5.1). По калибровочной кривой определите концентрацию серебра, соответствующую значению оптической плотности, полученному для раствора образца.

6. Расчет

Рассчитайте содержание нитрата серебра в образце в массовых процентах (% м/м) по формуле:

% (м/м) нитрата серебра = 1,5748 × c

10 × м

в котором:

m = масса взятой для анализа пробы в граммах (5.1); с — концентрация серебра в растворе пробы (5.1), микрограммов на миллилитр, полученная по калибровочной кривой. 7. Повторяемость (1)

При содержании нитрата серебра 4 % (м/м) разница между результатами двух определений, проводимых параллельно на одной и той же пробе, не должна превышать 0,05 % (м/м).

ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДИСУЛЬФИДА СЕЛА В ШАМПУНЯХ ПРОТИВ ПЕРХОТИ

А. Идентификация

1. Область применения и применение.

Этот метод описывает идентификацию дисульфида селена как селена в шампунях против перхоти.

2. Принцип

Селен идентифицируется по характерному цвету от желтого до оранжевого, образующемуся при реакции с мочевиной и йодидом калия.

3. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Азотная кислота концентрированная (d20 = 1,42 г/мл)

3.2. Мочевина

3.3. Раствор йодида калия, 10 % (масса/объем): растворите 10 г йодида калия в 100 мл воды.

4. Аппарат

4.1. Обычное лабораторное оборудование

4.2. Пробирка для пищеварения, емкость 100 мл

4.3. Варочный котел с подогревом

4.4. Фильтровальная бумага (Whatman № 42 или аналог) или мембранный фильтр 0,45 мм.

5. Процедура

5.1. Примерно к 1 г шампуня в пробирке для дигерирования (4.2) добавляют 2,5 мл концентрированной азотной кислоты (3.1) и дигерируют при 150°С в течение 30 минут в варочном котле с подогревом (4.3).

5.2. Разбавленную пробу разбавляют водой до 25 мл и фильтруют через фильтровальную бумагу или мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мм (4.4).

5.3. К 2,5 мл фильтрата добавляют 5 мл воды, 2,5 г мочевины (3,2) и кипятят. Остудить и добавить 1 мл раствора йодида калия (3.3).

5.4. Цвет от желтого до оранжевого, который быстро темнеет при стоянии, указывает на присутствие селена.

Б. Решимость

1. Область применения и применение.

Этот метод подходит для определения дисульфида селена в виде селена в шампунях против перхоти, содержащих до 4,5 % (м/м) дисульфида селена.

2. Принцип

Пробу разлагают азотной кислотой, и содержание селена в полученном гидролизате определяют с помощью атомно-абсорбционной спектрометрии.

3. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Азотная кислота концентрированная (d20 = 1,42 г/мл)

3.2. Раствор азотной кислоты, 5 % (по объему): добавьте 50 мл концентрированной азотной кислоты (3.1) к 500 мл воды в химический стакан, непрерывно помешивая. Перелейте этот раствор в мерную колбу емкостью один литр и доведите объем водой.

3.3. Исходный стандартный раствор селена, 1000 мг/мл в 0,5 М растворе азотной кислоты («SpectrosoL» или эквивалент)

4. Аппарат

4.1. Обычное лабораторное оборудование

4.2. Пробирка для пищеварения, емкость 100 мл

4.3. Варочный котел с подогревом

4.4. Фильтровальная бумага (Whatman № 42 или аналог) или мембранный фильтр 0,45 мм.

4.5. Атомно-абсорбционный спектрофотометр с селеновой лампой с полым катодом.

5. Процедура

5.1. Базовые приготовления

5.1.1. Точно взвешивают примерно 0,2 г (м грамм) однородной пробы шампуня и помещают в пробирку для разложения (4.2).

5.1.2. Добавляют 5 мл концентрированной азотной кислоты (3.1) и дигерируют при 150 °С в течение одного часа в варочном котле с подогревом (4.3).

5.1.3. Дайте раствору остыть и разбавьте его водой до 100 мл. Фильтруют через фильтровальную бумагу или мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мм (4.4) и сохраняют отфильтрованный раствор для определения.

5.2. Условия атомно-абсорбционной спектрометрии

Пламя: воздух-ацетилен

Длина волны: 196,0 нм

Коррекция фона: да

Состояние топлива: бедное; для максимального поглощения потребуется оптимизация высоты горелки и условий подачи топлива.

5.3. Калибровка

5.3.1. В ряд мерных колб вместимостью 100 мл переносят пипеткой по 1,0, 2,0, 3,0, 4,0 и 5,0 мл исходного стандартного раствора селена (3.3). В каждую колбу доводят до объема 5%-ный (по объему) раствор азотной кислоты (3.2) и перемешивают. Эти растворы содержат 10, 20, 30, 40 и 50 мг селена на миллилитр соответственно.

5.3.2. Измерьте оптическую плотность 5%-ного (объемного) раствора азотной кислоты (3.2) и используйте полученное значение в качестве нулевой концентрации селена для калибровочной кривой. Измерьте оптическую плотность каждого калибровочного стандарта селена (5.3.1). Постройте калибровочную кривую, связывающую значения оптической плотности с концентрацией селена.

5.4. Определение

Измерьте оптическую плотность раствора образца (5.1.3). По калибровочной кривой определяют концентрацию селена, соответствующую значению оптической плотности, полученному для раствора образца.

6. Расчет

Рассчитайте содержание дисульфида селена в образце в массовых процентах (% м/м) по формуле:

% (м/м) дисульфида селена = 1,812 × c

100 × м

в котором:

m — масса взятой для анализа пробы в граммах (5.1.1); с — концентрация селена в растворе пробы (5.1.3), микрограммов на миллилитр, полученная по калибровочной кривой. 7. Повторяемость (2)

При содержании дисульфида селена 1 % (м/м) разница между результатами двух определений, проводимых параллельно на одной и той же пробе, не должна превышать 0,05 % (м/м).

ОПРЕДЕЛЕНИЕ РАСТВОРИМОГО БАРИЯ И СТРОНЦИЯ В ПИГМЕНТАХ В ВИДЕ СОЛИ ИЛИ ОЗЕР

А. Определение растворимого бария

1. Область применения и применение.

Этот метод описывает процедуру извлечения и определения растворимого бария из пигментов в виде солей или озер.

2. Принцип

Пигмент экстрагируют 0,07 М раствором соляной кислоты в определенных условиях и количество бария в экстрагенте определяют методом атомно-абсорбционной спектрометрии.

3. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Этанол, абсолютный

3.2. Раствор соляной кислоты, 0,07 М

3.3. Раствор соляной кислоты, 0,5 М

3.4. Раствор хлорида калия, 8 % (масса): 16 г хлорида калия растворяют в 200 мл 0,07 М раствора соляной кислоты (3.2).

3.5. Стандартные растворы бария

3.5.1. Исходный стандартный раствор бария, 1000 мг/мл в 0,5 М растворе азотной кислоты («SpectrosoL» или эквивалент)

3.5.2. Стандартный раствор бария, 200 мг/мл: переносят пипеткой 20,0 мл исходного стандартного раствора бария (3.5.1) в мерную колбу вместимостью 100 мл. Доводят объем 0,07 М раствором соляной кислоты (3.2) и перемешивают.

4. Аппарат

4.1. Обычное лабораторное оборудование

4.2. pH-метр с точностью ± 0,02 единицы.

4.3. Наручный шейкер для колб

4.4. Мембранный фильтр с размером пор 0,45 мм.

4.5. Атомно-абсорбционный спектрофотометр с бариевой лампой с полым катодом.

5. Процедура

5.1. Базовые приготовления

5.1.1. Точно взвесьте примерно 0,5 г (м грамм) пигмента в коническую колбу. Чтобы обеспечить достаточный объем для эффективного перемешивания, не следует использовать колбы вместимостью менее 150 мл.

5.1.2. Добавляют пипеткой 1,0 мл этанола (3.1) и вращают колбу, чтобы обеспечить полное смачивание пигмента. Добавьте из бюретки точное количество 0,07 М раствора соляной кислоты (3.2), необходимое для получения соотношения объема кислоты к массе пигмента, равного точно 50 миллилитрам на грамм. Пусть общий объем экстрагента, включая этанол, составляет V мл. Помешивайте содержимое колбы в течение пяти секунд, чтобы обеспечить тщательное перемешивание содержимого.

5.1.3. С помощью рН-метра (4.2) измерьте рН полученной суспензии и, если оно выше 1,5, по каплям добавьте 0,5 М раствор соляной кислоты (3.3) до тех пор, пока значение не будет находиться в диапазоне от 1,4 до 1,5.

5.1.4. Закрывают пробкой и сразу же встряхивают колбу в течение 60 мин с помощью шейкера для колб (4.3). Шейкер должен работать на достаточно высокой скорости для образования пены. Фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мм (4.4) и собирают фильтрат. Не центрифугируйте экстракт перед фильтрованием. Переносят пипеткой 5,0 мл фильтрата в мерную колбу вместимостью 50 мл; Доводят до объема 0,07 М раствором соляной кислоты (3.2) и перемешивают. Этот раствор также используют для определения стронция (Часть Б).

5.1.5. В мерную колбу вместимостью 100 мл переносят пипеткой 5,0 мл раствора хлорида калия (3.4) и аликвоту (WBa мл) разбавленного фильтрата (5.1.4) для получения ожидаемой концентрации от 3 до 10 мг бария на миллилитр. . (Достаточной отправной точкой должна быть аликвота в 10 мл.) Доводят до объема 0,07 М раствором хлористоводородной кислоты (3.2) и перемешивают.

5.1.6. В тот же день определите концентрацию бария в растворе (5.1.5) методом атомно-абсорбционной спектрометрии.

5.2. Условия атомно-абсорбционной спектрометрии

Пламя: закись азота/ацетилен

Длина волны: 553,5 нм

Коррекция фона: нет

Состояние топлива: бедное; для максимального поглощения потребуется оптимизация высоты горелки и условий подачи топлива.

5.3. Калибровка

5.3.1. В ряд мерных колб вместимостью 100 мл пипеткой переносят по 1,0, 2,0, 3,0, 4,0 и 5,0 мл стандартного раствора бария (3.5.2). В каждую колбу переносят пипеткой по 5,0 мл раствора хлорида калия (3.4); Доводят до объема 0,07 М раствором соляной кислоты (3.2) и перемешивают. Эти растворы содержат 2,0, 4,0, 6,0, 8,0 и 10,0 мг бария на миллилитр соответственно.

Аналогичным образом приготовьте контрольный раствор, исключая стандартный раствор бария.

5.3.2. Измерьте оптическую плотность контрольного раствора (5.3.1) и используйте полученное значение в качестве нулевой концентрации бария для калибровочной кривой. Измерьте оптическую плотность каждого калибровочного стандарта бария (5.3.1). Постройте калибровочную кривую, связывающую значения оптической плотности с концентрацией бария.

5.4. Определение

Измерьте оптическую плотность раствора образца (5.1.5). По калибровочной кривой определите концентрацию бария, соответствующую значению оптической плотности, полученному для раствора образца.

6. Расчет

Содержание растворимого бария (% масс.) в пигменте определяется по формуле:

% (м/м) растворимого бария = c × V

10ВБА × м

в котором:

m — масса взятой для анализа пробы в граммах (5.1.1); с — концентрация бария в растворе пробы (5.1.5), микрограммов на миллилитр, полученная по калибровочной кривой; V = общий объем экстрагента, миллилитры (5.1.2); и WBa = объем экстракта в миллилитрах, взятый в 5.1.5. 7. Повторяемость

Наилучшая доступная оценка повторяемости (ISO 5725) для этого метода составляет 0,3 % при содержании растворимого бария 2 % (м/м).

8. Замечания

8.1. При определенных условиях поглощение бария может быть увеличено за счет присутствия кальция. Этому можно противостоять добавлением ионов магния в концентрации 5 г на литр (3).

8.2. В качестве альтернативы пламенной атомно-абсорбционной спектрометрии допускается использование индуктивно-связанной плазменно-оптической эмиссионной спектрометрии.

Б. Определение растворимого стронция

1. Область применения и применение.

Этот метод описывает процедуру извлечения и определения растворимого стронция из пигментов в виде солей или озер.

2. Принцип

Пигмент экстрагируют 0,07 М раствором соляной кислоты при определенных условиях и количество стронция в экстрагенте определяют методом атомно-абсорбционной спектрометрии.

3. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Этанол, абсолютный

3.2. Раствор соляной кислоты, 0,07 М

3.3. Раствор хлорида калия, 8 % (масса): 16 г хлорида калия растворяют в 200 мл 0,07 М раствора соляной кислоты (3.2).

3.4. Стандартные растворы стронция

3.4.1. Исходный стандартный раствор стронция, 1000 мг/мл в 0,5 М растворе азотной кислоты («SpectrosoL» или эквивалент)

3.4.2. Стандартный раствор стронция, 100 мг/мл: переносят пипеткой 10,0 мл исходного стандартного раствора стронция (3.4.1) в мерную колбу вместимостью 100 мл. Доводят объем 0,07 М раствором соляной кислоты (3.2) и перемешивают.

4. Аппарат

4.1. Обычное лабораторное оборудование

4.2. Мембранный фильтр с размером пор 0,45 мм.

4.3. Атомно-абсорбционный спектрофотометр, оснащенный стронциевой лампой с полым катодом.

5. Процедура

5.1. Базовые приготовления

Раствор, приготовленный по А.5.1.4, используют для определения содержания растворимого стронция.

5.1.1. В мерную колбу вместимостью 100 мл пипеткой переносят 5,0 мл раствора хлорида калия (3.3) и аликвоту (WSr мл) разбавленного фильтрата (А.5.1.4) для получения ожидаемой концентрации стронция от 2 до 5 мг. за миллилитр. (Достаточной отправной точкой должна быть аликвота в 25 мл.) Доводят объем раствора 0,07 М раствором хлористоводородной кислоты (3.2) и перемешивают.

5.1.2. В тот же день определите концентрацию стронция в растворе (5.1.1) методом атомно-абсорбционной спектрометрии.

5.2. Условия атомно-абсорбционной спектрометрии

Пламя: закись азота/ацетилен

Длина волны: 460,7 нм

Коррекция фона: нет

Состояние топлива: бедное; для максимального поглощения потребуется оптимизация высоты горелки и условий подачи топлива.

5.3. Калибровка

5.3.1. В серию мерных колб вместимостью 100 мл пипеткой переносят по 1,0, 2,0, 3,0, 4,0 и 5,0 мл стандартного раствора стронция (3.4.2). В каждую колбу переносят пипеткой по 5,0 мл раствора калия хлорида (3.3); Доводят до объема 0,07 М раствором соляной кислоты (3.2) и перемешивают. Эти растворы содержат 1,0, 2,0, 4,0 и 5,0 мг стронция на миллилитр соответственно.

Аналогичным образом приготовьте контрольный раствор, исключая стандартный раствор стронция.

5.3.2. Измерьте оптическую плотность контрольного раствора (5.3.1) и используйте полученное значение в качестве нулевой концентрации стронция для калибровочной кривой. Измерьте оптическую плотность каждого калибровочного стандарта стронция (5.3.1). Постройте калибровочную кривую, связывающую пиковые значения поглощения с концентрацией стронция.

5.4. Определение

Измерьте оптическую плотность раствора образца (5.1.1). По калибровочной кривой определяют концентрацию стронция, соответствующую значению оптической плотности, полученному для раствора образца.

6. Расчет

Содержание растворимого стронция (% масс.) в пигменте определяется по формуле:

% (м/м) растворимого стронция = c × V

10WSr × м

в котором:

m — масса пробы, взятой для анализа, в граммах (А.5.1.1); с — концентрация стронция в растворе пробы (5.1.1), микрограммов на миллилитр, полученная по калибровочной кривой; V = объем экстрагента в миллилитрах (А.5.1.2); и WSr = объем экстракта, миллилитры, взятый в 5.1.1. 7. Повторяемость

Наилучшая доступная оценка повторяемости (ISO 5725) для этого метода составляет 0,09 % для содержания растворимого стронция 0,6 % (м/м).

8. Замечание

В качестве альтернативы пламенной атомно-абсорбционной спектрометрии допускается использование индуктивно-связанной плазменно-оптической эмиссионной спектрометрии.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕНЗИЛОВОГО СПИРТА В КОСМЕТИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ

А. Идентификация

1. Область применения и применение.

Этот метод описывает идентификацию бензилового спирта в косметических продуктах.

2. Принцип

Бензиловый спирт идентифицируют методом тонкослойной хроматографии на пластинках силикагеля.

3. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Бензиловый спирт

3.2. Хлороформ

3.3. Этанол, абсолютный

3.4. н-пентан

3.5. Растворитель: диэтиловый эфир.

3.6. Стандартный раствор бензилового спирта: отвешивают 0,1 г бензилового спирта (3.1) в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем этанолом (3.3) и перемешивают.

3.7. Пластинки для тонкослойной хроматографии стеклянные размером 100×200 мм или 200×200 мм, покрытые слоем силикагеля 60 F254 толщиной 0,25 мм.

3.8. Визуализирующий агент: 12-молибдофосфорная кислота, 10 % (масс./об.) в этаноле (3.3).

4. Аппарат

4.1. Обычный аппарат для тонкослойной хроматографии

4.2. Хроматографический резервуар, двойная лотковая камера, габаритные размеры примерно 80 мм × 230 мм × 240 мм.

4.3. Хроматографическая бумага: Whatman или эквивалент.

4.4. Ультрафиолетовая лампа, длина волны 254 нм.

5. Процедура

5.1. Базовые приготовления

Отвешивают 1,0 г анализируемого продукта в мерную колбу вместимостью 10 мл. Добавьте 3 мл хлороформа (3.2) и энергично встряхивайте до диспергирования продукта. Доведите объем этанолом (3.3) и энергично встряхните до получения прозрачного или почти прозрачного раствора.

5.2. Тонкослойная хроматография

5.2.1. Пропитайте хроматографический резервуар (4.2) н-пентаном (3.4) следующим образом: выстелите стенку камеры, прилегающую к задней части, хроматографической бумагой (4.3), убедившись, что нижний край бумаги находится в желобе. Перенесите 25 мл н-пентана (3.4) в задний желоб, выливая этот растворитель на открытую поверхность подкладки хроматографической бумаги. Немедленно закройте крышку и дайте резервуару постоять 15 минут.

5.2.2. Наносят 10 мл раствора пробы (5.1) и 10 мл стандартного раствора бензилового спирта (3.6) в подходящие точки на начальной линии пластинки для тонкослойной хроматографии (3.7). Дать высохнуть.

5.2.3. Внесите пипеткой 10 мл диэтилового эфира (3.5) в переднее отверстие резервуара и сразу же после этого поместите планшет (5.2.2) в тот же резервуар. Быстро замените крышку бака и разверните пластину на расстояние 150 мм. Выньте пластинку из хроматографического резервуара и дайте ей высохнуть при комнатной температуре.

5.2.4. Рассмотрите пластинку (5.2.3) в ультрафиолетовом свете и отметьте положение фиолетовых пятен. Опрыскайте пластинку визуализирующим веществом (3.8), а затем нагревайте пластину при температуре 120 °С в течение примерно 15 минут. Бензиловый спирт выглядит как темно-синее пятно.

5.2.5. Рассчитайте значение Rf, полученное для стандартного раствора бензилового спирта. Темно-синее пятно с тем же значением Rf, полученное в растворе образца, указывает на присутствие бензилового спирта.

Предел обнаружения: 0,1 мг бензилового спирта

Б. Решимость

1. Область применения и применение.

Этот метод описывает определение бензилового спирта в косметических продуктах.

2. Определение

Количество бензилового спирта, определенное этим методом, выражают в массовых процентах (% м/м).

3. Принцип

Пробу экстрагируют метанолом и количество бензилового спирта в экстракте определяют с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

4. Реагенты

Все реагенты должны иметь аналитическую чистоту и при необходимости подходить для ВЭЖХ.

4.1. Метанол

4.2.4. 4-этоксифенол

4.3. Бензиловый спирт

4.4. Подвижная фаза: метанол (4.1)/вода (45:55; по объему).

4.5. Исходный раствор бензилового спирта: точно отвешивают примерно 0,1 г бензилового спирта (4.3) в мерную колбу вместимостью 100 мл. Доводят объем метанолом (4.1) и перемешивают.

4.6. Исходный раствор внутреннего стандарта: точно отвешивают примерно 0,1 г 4-этоксифенола (4.2) в мерную колбу вместимостью 100 мл. Доводят объем метанолом (4.1) и перемешивают.

4.7. Стандартные растворы: в ряд мерных колб вместимостью 25 мл переносят пипетками количества маточного раствора бензилового спирта (4.5) и маточного раствора внутреннего стандарта (4.6) согласно таблице, приведенной ниже. Доводят объем метанолом (4.1) и перемешивают.

/* Таблицы: см. OJ */

5.1. Обычное лабораторное оборудование

5.2. Высокопроизводительное хроматографическое оборудование с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны и инжекторной петлей объемом 10 мл.

5.3. Аналитическая колонка: колонка из нержавеющей стали размером 250 мм × 4,6 мм, заполненная 5 мм Spherisorb ODS или эквивалентом.

5.4. Водяная баня

5.5. Ультразвуковая ванна

5.6. Центрифуга

5.7. Центрифужные пробирки емкостью 15 мл

6. Процедура

6.1. Базовые приготовления

6.1.1. Точно взвешивают примерно 0,1 г (м грамм) образца в центрифужную пробирку (5.7) и добавляют 5 мл метанола (4.1).

6.1.2. Нагревают в течение 10 мин на водяной бане (5.4), поддерживаемой при температуре 50 °С, затем помещают пробирку в ультразвуковую баню (5.5) до полного диспергирования образца.

6.1.3. Остудить, затем центрифугировать при 3500 об/мин в течение пяти минут.

6.1.4. Перенесите надосадочную жидкость в мерную колбу емкостью 25 мл.

6.1.5. Повторно экстрагируют пробу еще 5 мл метанола (4.1). Объедините экстракты в мерной колбе емкостью 25 мл.

6.1.6. Переносят пипеткой 2,0 мл исходного раствора внутреннего стандарта (4.6) в мерную колбу вместимостью 25 мл. Доводят объем метанолом (4.1) и перемешивают. Это решение используется на этапе определения анализа, описанного в 6.4.

6.2. Хроматография

6.2.1. Оборудование для высокоэффективной жидкостной хроматографии (5.2) устанавливают обычным способом. Доведите скорость потока подвижной фазы (4.4) до 2,0 мл в минуту.

6.2.2. Установите длину волны УФ-детектора (5.2) на 210 нм.

6.3. Калибровка

6.3.1. Вводят по 10 мл каждого стандартного раствора бензилового спирта (4.7) и измеряют площади пиков бензилового спирта и 4-этоксифенола.

6.3.2. Для каждого стандартного раствора бензилового спирта (4.7) рассчитайте отношение площадей пиков бензилового спирта к 4-этоксифенолу. Постройте калибровочную кривую, используя эти соотношения по оси ординат и соответствующие концентрации бензилового спирта в мг на миллилитр по оси абсцисс.

6.4. Определение

6.4.1. Вводят 10 мл раствора пробы (6.1.6) и измеряют площади пиков бензилового спирта и 4-этоксифенола. Рассчитайте отношение площадей пиков бензилового спирта к 4-этоксифенолу. Повторите этот процесс с дополнительными аликвотами раствора образца по 10 мл до получения устойчивых результатов.

6.4.2. По калибровочной кривой (6.3.2) определяют концентрацию бензилового спирта, соответствующую отношению площадей пика бензилового спирта к 4-этоксифенолу.

7. Расчет

Рассчитайте содержание бензилового спирта в образце в массовых процентах по формуле:

% (м/м) бензилового спирта = c

400 × м

в котором:

m = масса пробы, взятой для анализа (6.1.1), в граммах; с — концентрация бензилового спирта в растворе пробы (6.1.6), микрограммов на миллилитр, полученная по калибровочной кривой. 8. Повторяемость (4)

При содержании бензилового спирта 1 % (м/м) разница между результатами двух определений, проводимых параллельно на одной и той же пробе, не должна превышать 0,10 %.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ ЦИРКОНИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ЦИРКОНИЯ, АЛЮМИНИЯ И ХЛОРА В НЕАЭРОЗОЛЬНЫХ АНТИПЕРСПИРАНТАХ

Способ включает пять этапов:

А. Идентификация циркония

Б. Определение циркония

C. Определение алюминия

D. Определение хлора

E. Расчет отношения атомов алюминия к атомам циркония и атомов алюминия плюс циркония к атомам хлора

А. Идентификация циркония

1. Область применения и применение.

Метод описывает идентификацию циркония в неаэрозольных косметических средствах-антиперспирантах. Не было предпринято никаких попыток описать методы, подходящие для идентификации комплекса гидроксида хлорида алюминия-циркония [AlxZr(OH)yClz.nH2O].

2. Принцип

Цирконий идентифицируется по характерному красно-фиолетовому осадку, образующемуся с ализарином красным S в сильнокислых условиях.

3. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Соляная кислота, концентрированная (d20 = 1,18 г/мл)

3.2. Раствор ализарина красного S (CI. 58005): 2% (масс./об.) водного сульфоната ализарина натрия.

4. Аппарат

4.1. Обычное лабораторное оборудование

5. Процедура

5.1. Примерно к 1 г образца в пробирке добавьте 2 мл воды. Закройте пробкой и встряхните.

5.2. Добавьте три капли раствора ализарина красного S (3.2), а затем 2 мл концентрированной соляной кислоты (3.1). Закройте пробкой и встряхните.

5.3. Оставьте постоять примерно две минуты.

5.4. Надосадочный раствор и осадок красно-фиолетового цвета указывают на присутствие циркония.

Б. Определение циркония

1. Область применения и применение.

Этот метод пригоден для определения циркония в комплексах хлорида алюминия и циркония с гидроксидом до максимальной концентрации 7,5 % (м/м) циркония в неаэрозольных антиперспирантах.

2. Принцип

Цирконий извлекают из продукта в кислой среде и определяют методом пламенной атомно-абсорбционной спектрометрии.

3. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Соляная кислота, концентрированная (d20 = 1,18 г/мл)

3.2. Раствор соляной кислоты, 10 % (по объему): добавьте 100 мл концентрированной соляной кислоты (3.1) к 500 мл воды в химический стакан, непрерывно помешивая. Перелейте этот раствор в мерную колбу емкостью один литр и доведите объем водой.

3.3. Исходный стандартный раствор циркония, 1000 мг/мл в 0,5 М растворе соляной кислоты («SpectrosoL» или эквивалент).

3.4. Алюминия хлорид (гидратированный) [AlCl3.6H2O]: реактив: растворить 22,6 г гексагидрата хлорида алюминия в 250 мл 10 % (по объему) раствора соляной кислоты (3.2).

3.5. Реагент хлорид аммония: 5,0 г хлорида аммония растворяют в 250 мл 10 % (по объему) раствора соляной кислоты (3.2).

4. Аппарат

4.1. Обычное лабораторное оборудование

4.2. Нагреватель с магнитной мешалкой

4.3. Фильтровальная бумага (Ватман № 41 или аналог)

4.4. Атомно-абсорбционный спектрофотометр с циркониевой лампой с полым катодом.

5. Процедура

5.1. Базовые приготовления

5.1.1. Точно взвесьте примерно 1,0 г (м грамм) однородного образца продукта в стакан емкостью 150 мл. Добавляют 40 мл воды и 10 мл концентрированной соляной кислоты (3.1).

5.1.2. Поместите стакан на нагреватель с магнитной мешалкой (4.2). Начинаем помешивать и доводим до кипения. Чтобы предотвратить быстрое высыхание, поместите на стакан часовое стекло. Прокипятите пять минут, снимите стакан с огня и остудите до комнатной температуры.

5.1.3. Используя фильтровальную бумагу (4.3), отфильтруйте содержимое стакана в мерную колбу вместимостью 100 мл. Промойте стакан двумя порциями воды по 10 мл и добавьте промывные воды после фильтрации в колбу. Доведите до объема водой и перемешайте. Этот раствор также используют для определения алюминия (Часть С).

5.1.4. В мерную колбу вместимостью 50 мл пипеткой переносят 20,00 мл раствора пробы (5.1.3), 5,00 мл реактива хлорида алюминия (3.4) и 5,00 мл реактива хлорида аммония (3.5). . Доведите объем раствора 10%-ным (по объему) раствором соляной кислоты (3.2) и перемешайте.

5.2. Условия атомно-абсорбционной спектрометрии

Пламя: закись азота/ацетилен

Длина волны: 360,1 нм

Коррекция фона: нет

Состояние топлива: богатое; для максимального поглощения потребуется оптимизация высоты горелки и условий подачи топлива.

5.3. Калибровка

5.3.1. В серию мерных колб вместимостью 50 мл переносят пипеткой по 5,00, 10,00, 15,00, 20,00 и 25,00 мл исходного стандартного раствора циркония (3.3). В каждую мерную колбу переносят пипеткой по 5,00 мл реактива хлорида алюминия (3,4) и 5,00 мл реактива хлорида аммония (3.5). Доведите объем раствора 10%-ным (по объему) раствором соляной кислоты (3.2) и перемешайте. Эти растворы содержат 100, 200, 300, 400 и 500 мг циркония на миллилитр соответственно.

Аналогичным образом приготовьте контрольный раствор, исключая стандартный раствор циркония.

5.3.2. Измерьте оптическую плотность контрольного раствора (5.3.1) и используйте полученное значение в качестве нулевой концентрации циркония для калибровочной кривой. Измерьте оптическую плотность каждого циркониевого калибровочного стандарта (5.3.1). Постройте калибровочную кривую, связывающую значения оптической плотности с концентрацией циркония.

5.4. Определение

Измерьте оптическую плотность раствора образца (5.1.4). По калибровочной кривой определяют концентрацию циркония, соответствующую значению оптической плотности, полученному для раствора образца.

6. Расчет

Рассчитайте содержание циркония в образце в массовых процентах по формуле:

% (м/м) циркония = c

40 × м

в котором:

m — масса взятой для анализа пробы в граммах (5.1.1); с — концентрация циркония в растворе пробы (5.1.4), микрограммов на миллилитр, полученная по калибровочной кривой.

7. Повторяемость (5)

При содержании циркония 3,00 % (м/м) разница между результатами двух определений, проводимых параллельно на одной и той же пробе, не должна превышать 0,10 % (м/м).

8. Замечание

В качестве альтернативы пламенной атомно-абсорбционной спектрометрии допускается использование индуктивно-связанной плазменно-оптической эмиссионной спектрометрии.

C. Определение алюминия

1. Область применения и применение.

Этот метод подходит для определения содержания алюминия в комплексах хлорида алюминия и циркония с гидроксидом до максимальной концентрации 12 % (м/м) алюминия в неаэрозольных антиперспирантах.

2. Принцип

Алюминий извлекают из продукта в кислой среде и определяют методом пламенной атомно-абсорбционной септрометрии.

3. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Соляная кислота, концентрированная (d20 = 1,18 г/мл)

3.2. Раствор соляной кислоты, 1 % (по объему): добавьте 10 мл концентрированной соляной кислоты (3.1) к 500 мл воды в химический стакан, непрерывно помешивая. Перелейте этот раствор в мерную колбу емкостью один литр и доведите объем водой.

3.3. Исходный стандартный раствор алюминия, 1000 мг/мл в 0,5 М растворе азотной кислоты («SpectrosoL» или эквивалент).

3.4. Реактив хлорид калия: 10,0 г хлорида калия растворяют в 250 мл 1 % (по объему) раствора соляной кислоты (3.2).

4. Аппарат

4.1. Обычное лабораторное оборудование

4.2. Атомно-абсорбционный спектрофотометр, оснащенный алюминиевой лампой с полым катодом.

5. Процедура

5.1. Базовые приготовления

Раствор, приготовленный в Б.5.1.3, используют для определения содержания алюминия.

5.1.1. В мерную колбу вместимостью 100 мл пипеткой переносят 5,00 мл раствора пробы (Б.5.1.3) и 10,00 мл реактива хлорида калия (3.4). Доведите объем раствора 1%-ным (по объему) раствором соляной кислоты (3.2) и перемешайте.

5.2. Условия атомно-абсорбционной спектрометрии

Пламя: закись азота/ацетилен

Длина волны: 309,3 нм

Коррекция фона: нет

Состояние топлива: богатое; для максимального поглощения потребуется оптимизация высоты горелки и условий подачи топлива.

5.3. Калибровка

5.3.1. В серию мерных колб вместимостью 100 мл переносят пипеткой по 1,00, 2,00, 3,00, 4,00 и 5,00 мл исходного стандартного раствора алюминия (3.3). В каждую мерную колбу переносят пипеткой по 10,00 мл реактива хлорида калия (3.4) и доводят до объема 1%-ным (по объему) раствором соляной кислоты (3.2) и перемешивают. Эти растворы содержат 10, 20, 30, 40 и 50 мг алюминия на миллилитр.

Аналогичным образом приготовьте контрольный раствор, исключая стандартный раствор алюминия.

5.3.2. Измерьте оптическую плотность контрольного раствора (5.3.1) и используйте полученное значение в качестве нулевой концентрации алюминия для калибровочной кривой. Измерьте поглощение каждого калибровочного стандарта алюминия. Постройте калибровочную кривую, связывающую поглощение с концентрацией алюминия.

5.4. Определение

Измерьте оптическую плотность раствора образца (5.1.1). По калибровочной кривой определите концентрацию алюминия, соответствующую значению оптической плотности, полученному для раствора образца.

6. Расчет

Рассчитайте содержание алюминия в образце в массовых процентах по формуле:

% (м/м) алюминия = c

5 × м

в котором:

m — масса пробы, взятой для анализа, в граммах (В.5.1.1); с — концентрация алюминия в растворе пробы (5.1.1), микрограммов на миллилитр, полученная по калибровочной кривой. 7. Повторяемость (6)

При содержании алюминия 3,5 % (м/м) разница между результатами двух определений, проводимых параллельно на одной и той же пробе, не должна превышать 0,10 % (м/м).

8. Замечание

В качестве альтернативы пламенной атомно-абсорбционной спектрометрии допускается использование индуктивно-связанной плазменно-оптической эмиссионной спектрометрии.

D. Определение хлора

1. Объем и область определения

Этот метод подходит для определения хлора, присутствующего в виде хлорид-иона в комплексах хлорида алюминия-циркония в неаэрозольных антиперспирантах.

2. Принцип

Хлорид-ион в продукте определяют потенциометрическим титрованием стандартным раствором нитрата серебра.

3. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Азотная кислота концентрированная (d20 = 1,42 г/мл)

3.2. Раствор азотной кислоты, 5 % (по объему): добавьте 25 мл концентрированной азотной кислоты (3.1) к 250 мл воды в химический стакан, непрерывно помешивая. Перенесите этот раствор в мерную колбу вместимостью 500 мл и доведите объем водой.

3.3. Ацетон

3.4. Нитрат серебра, 0,1 М мерный раствор («АналаР» или аналог).

4. Аппарат

4.1. Обычное лабораторное оборудование

4.2. Нагреватель с магнитной мешалкой

4.3. Серебряный электрод

4.4. Каломельный электрод сравнения

4.5. pH/милливольт-метр, подходящий для потенциометрического титрования.

5. Процедура

5.1. Базовые приготовления

5.1.1. Точно взвесьте в стакан емкостью 250 мл примерно 1,0 г (м грамм) однородного образца продукта. Добавьте 80 мл воды и 20 мл 5%-ного (по объему) раствора азотной кислоты (3.2).

5.1.2. Поместите стакан на нагреватель с магнитной мешалкой (4.2). Начинаем помешивать и доводим до кипения. Чтобы предотвратить быстрое высыхание, поместите на стакан часовое стекло. Прокипятите пять минут, снимите стакан с огня и остудите до комнатной температуры.

5.1.3. Добавьте 10 мл ацетона (3.3), опустите электроды (4.3 и 4.4) ниже поверхности раствора и начните перемешивание. Титруйте потенциометрически 0,1 М раствором нитрата серебра (3.4) и постройте дифференциальную кривую для определения конечной точки (V мл).

6. Расчет

Рассчитайте содержание хлора в пробе в массовых процентах по формуле:

% (м/м) хлора = 0,3545 × В

м

в котором:

m = масса в граммах пробы, взятой для анализа (5.1.1), и v = объем 0,1 М нитрата серебра в миллилитрах, титрованный в конечной точке (5.1.3). 7. Повторяемость (7)

При содержании хлора 4 % (м/м) разница между результатами двух определений, проводимых параллельно на одной и той же пробе, не должна превышать 0,10 % (м/м).

E. Расчет отношения атомов алюминия к атомам циркония и атомов алюминия плюс циркония к атомам хлора

1. Расчет соотношения атомов алюминия и атомов циркония.

Рассчитайте соотношение Al:Zr по формуле:

Соотношение Al:Zr = Al% (м/м) × 91,22

Zr % (м/м) × 26,98

2. Расчет отношения атомов алюминия плюс циркония к атомам хлора.

Рассчитайте соотношение (Al+Zr):Cl по формуле:

Al% (м/м)

26,98 + Zr % (м/м)

91,22

(Al + Zr): соотношение Cl =

Cl % (м/м)

35,45

ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕКСАМИДИНА, ДИБРОМОГЕКСАМИДИНА, ДИБРОМОПРОПАМИДИНА И ХЛОРГЕКСИДИНА 1. Область применения и область применения

Этот метод описывает качественное и количественное определение:

- гексамидин и его соли, включая изетионат и 4-гидроксибензоат,

- дибромгексамидин и его соли, включая изетионат,

- дибромпропамидин и его соли, включая изетионат,

- хлоргексидина диацетат, диглюконат и дигидрохлорид в косметических продуктах.

2. Определение

Концентрации гексамидина, дибромгексамидина, дибромпропамидина и хлоргексидина, определенные этим методом, выражаются в массовых процентах (% м/м).

3. Принцип

Идентификацию и определение проводят с помощью ионно-парной обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с последующим ультрафиолетовым спектрофотометрическим детектированием. Гексамидин, дибромгексамидин, дибромпропрамидин и хлоргексидин идентифицируются по времени удерживания на хроматографической колонке.

4. Реагенты

Все реагенты должны иметь аналитическую чистоту и при необходимости подходить для ВЭЖХ.

4.1. Метанол

4.2. 1-гептансульфокислота, натриевая соль, моногидрат

4.3. Уксусная кислота ледяная (d20 = 1,05 г/мл)

4.4. Хлорид натрия

4.5. Подвижные фазы

4.5.1. Растворитель I: 0,005 М раствор натриевой соли 1-гептансульфокислоты, моногидрат (4.2) в метаноле (4.1), доведенный до кажущегося pH 3,5 с помощью ледяной уксусной кислоты (4.3).

4.5.2. Растворитель II: 0,005 М раствор натриевой соли 1-гептансульфокислоты моногидрата (4.2) в воде, доведенный до pH 3,5 ледяной уксусной кислотой (4.3).

Примечание. При необходимости улучшить форму пиков подвижные фазы можно модифицировать и приготовить следующим образом:

- растворитель I: 5,84 г натрия хлорида (4.4) и 1,1013 г 1-гептансульфоновой кислоты, натриевой соли, моногидрата (4.2) растворяют в 100 мл воды. Добавьте 900 мл метанола (4.1) и доведите кажущийся pH до 3,5 ледяной уксусной кислотой (4.3),

- растворитель II: 5,84 г хлорида натрия (4.4) и 1,1013 г 1-гептансульфокислоты, натриевой соли, моногидрата (4.2) растворяют в одном литре воды и доводят pH до 3,5 ледяной уксусной кислотой. (4.3).

4.6. Гексамидиндиизетионат [C20H26N4O2.2C2H6O4S]

4.7. Дибромгексамидиндиизетионат [C20H24Br2N4O2.2C2H6O4S]

4.8. Дибромпропамидиндиизетионат [C17H18Br2N4O2.2C2H6O4S]

4.9. Хлоргексидина диацетат [C22H30Cl2N10.2C2H4O2]

4.10. Стандартные растворы: готовят 0,05 % (масс./об.) растворы каждого из четырех консервантов (4.6–4.9) в растворителе I (4.5.1).

4.11. 3,4,4′-трихлоркарбанилид (триклокарбан)

4.12. 4,4′-Дихлор-3-(трифторметил)карбанилид (галогенкарбан)

5. Аппарат

5.1. Обычное лабораторное оборудование

5.2. Высокоэффективный жидкостный хроматограф с УФ-детектором с переменной длиной волны

5.3. Аналитическая колонка: нержавеющая сталь, длина 30 см, внутренний диаметр 4 мм, упакованная в m-Bondapack C18, 10 мм или эквивалент.

5.4. Ультразвуковая ванна

6. Идентификация

6.1. Базовые приготовления

Отвешивают примерно 0,5 г образца в мерную колбу вместимостью 10 мл и доводят до объема растворителем I (4.5.1). Поместите колбу в ультразвуковую ванну (5.4) на 10 минут. Отфильтруйте или центрифугируйте раствор. Соберите фильтрат или супернатант для хроматографии.

6.2. Хроматография

6.2.1. Градиент подвижной фазы

температура до 35°С.

6.2.3. Установите длину волны детектора на 264 нм.

6.2.4. Вводят по 10 мл каждого из растворов сравнения (4.10) и записывают их хроматограммы.

6.2.5. Вводят 10 мл раствора пробы (6.1) и записывают хроматограмму.

6.3. Определите, присутствует ли гексамидин, дибромгексамидин, дибромпропамидин или хлоргексидин, сравнивая время удерживания пика(ов), зарегистрированного в 6.2.5, со временем удерживания эталонных растворов в 6.2.4.

7. Решимость

7.1. Определение

Приготовление стандартных растворов.

В качестве внутреннего стандарта используйте один из консервантов (от 4,6 до 4,9), отсутствующий в образце. Если это невозможно, можно использовать триклокарбан (4.11) или галокарбан (4.12).

7.1.1. Исходный раствор 0,05 % (масс./об.) в растворителе I (4.5.1) консерванта, указанного в 6.3.

7.1.2. Исходный раствор 0,05 % (масс./об.) в растворителе I (4.5.1) консерванта, выбранного в качестве внутреннего стандарта.

7.1.3. Для каждого идентифицированного консерванта готовят четыре стандартных раствора, перенося в ряд мерных колб вместимостью 10 мл количество маточного раствора идентифицированного консерванта (7.1.1) и соответствующие количества маточного раствора внутреннего стандарта (7.1.2). согласно таблице, представленной ниже. В каждую колбу доводят растворитель I (4.5.1) до объема и перемешивают.

/* Таблицы: см. OJ */

7.2.1. Точно отвешивают примерно 0,5 г (п грамм) образца в мерную колбу вместимостью 10 мл, добавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта (7.1.2) и 6 мл растворителя I (4.5.1) и перемешивают.

7.2.2. Поместите колбу в ультразвуковую ванну (5.4) на 10 минут. Прохладный. Доведите объем растворителем I и перемешайте. Центрифугируйте или фильтруйте через сложенную фильтровальную бумагу. Соберите надосадочную жидкость или фильтрат, в зависимости от обстоятельств, для хроматографии.

7.3. Хроматография

7.3.1. Отрегулируйте градиент подвижной фазы, скорость потока, температуру колонки и длину волны детектора оборудования ВЭЖХ (5.2) в соответствии с условиями, требуемыми на этапе идентификации (6.2.1–6.2.3).

7.3.2. Вводят 10 мл раствора пробы (7.2.2) и измеряют площади пиков. Повторите этот процесс с дополнительными аликвотами раствора образца по 10 мл до получения устойчивых результатов. Рассчитайте отношение площади пика анализируемого соединения к площади пика внутреннего стандарта.

7.4. Калибровка

7.4.1. Вводят по 10 мл каждого стандартного раствора (7.1.3) и измеряют площади пиков.

7.4.2. Для каждого стандартного раствора (7.1.3) рассчитывают отношение площади пика гексамидина, дибромгексамидина, дибромпропамидина или хлоргексидина к площади пика внутреннего стандарта. Постройте калибровочную кривую, используя эти соотношения по оси ординат и соответствующие концентрации идентифицированного консерванта в стандартных растворах в микрограммах на миллилитр по оси абсцисс.

7.4.3. По калибровочной кривой (7.4.2) определяют концентрацию идентифицированного консерванта, соответствующую соотношению площадей пиков, рассчитанному в 7.3.2.

8. Расчет

8.1. Рассчитайте содержание гексамидина, дибромгексамидина, дибромпропамидина или хлоргексидина в образце в массовых процентах по формуле:

% (м/м) = с

1000 × п × МВт1

МВ2

в котором:

р — масса пробы, взятой для анализа, в граммах (7.2.1); c = концентрация консерванта в растворе пробы, микрограммов на миллилитр, полученная по калибровочной кривой; MW1 = молекулярная масса основной формы присутствующего консерванта; MW2 = молекулярная масса соответствующей соли (см. пункт 10). 9. Повторяемость (8)

При концентрации гексамидина, дибромгексамидина, дибромпропамидина или хлоргексидина 0,1 % (м/м) разница между результатами двух определений, проводимых параллельно на одной и той же пробе, не должна превышать 0,005 %.

10. Таблица весов формул

Гексамидин C20H26N4O2 354,45

Гексамидиндиизетионат C20H26N4O2 · 2C2H6O4S 606,72

Гексамидина ди-п-гидроксибензоат C20H26N4O2 · 2C7H6O3 630,71

Дибромгексамидин C20H24Br2N4O2 512,24

Дибромгексамидиндиизетионат C20H24Br2N4O2 · 2C2H6O4S 764,51

Дибромпропамидин C17H18Br2N4O2 470,18

Дибромпропамидиндиизетионат C17H18Br2N4O2 · 2C2H6O4S 722,43

Хлоргексидин C22H30Cl2N10 505,45

Хлоргексидина диацетат C22H30Cl2N10 · 2C2H4O2 625,56

Хлоргексидина диглюконат C22H30Cl2N10 · 2C6H12O7 897,76

Хлоргексидина дигидрохлорид C22H30Cl2N10 · 2HCl 578,37

(1) ИСО 5725.

(2) ИСО 5725.

(3) «Магний как модификатор для определения бария методом пламенной атомно-эмиссионной спектрометрии». Джерроу М. и др., Analytical Proceedings, 1991, 28, 40.

(4) ИСО 5725.

(5) ИСО 5725.

(6) ИСО 5725.

(7) ИСО 5725.

(8) ИСО 5725.